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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 【求助】考马氏亮蓝测定蛋白含量建立的标准曲线
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tommy6920

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】考马氏亮蓝测定蛋白含量建立的标准曲线 已有5人参与

本人在用考马斯亮蓝测定蛋白质含量，要做标准曲线，文献上标准曲线不是直线，那么还要求相关系数达到三个9吗？有哪位虫友做过相关的实验，麻烦您给一下意见，不甚感激！！
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1楼 2010-04-05 11:03:02
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tommy6920

银虫 (小有名气)
怎么没人呢！！急啊...
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2楼2010-04-06 09:45:14
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qunbao62

银虫 (小有名气)
tommy6920(金币+2):谢谢 2010-04-08 09:21
应该达到三个9，可根据测出的数据计算出回归方程
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打酱油是一个态度，所谓的沉默的大多数，所谓的“非暴力不合作”；
3楼2010-04-06 11:07:29
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tommy6920

银虫 (小有名气)
楼上，你做到三个九了吗？我看其他文献上野没有做到三个九的啊！！我也知道一般用紫外可见分光光度计都是要求达到三个九的。
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4楼2010-04-08 09:22:53
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pal2004

木虫 (正式写手)
tommy6920(金币+1): 2010-04-08 20:02
Bradford法估计能有两个9就不错了，我做的通常只有一个9，不过你看看10版药典就知道了，蛋白质含量测定法里根本就没有Bradford法。所以别对该法的精度抱太大期望，精度能接受就行，毕竟该法比较快捷。
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5楼2010-04-08 10:27:14
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xyffly804

金虫 (初入文坛)
tommy6920(金币+1):谢谢！ 2010-04-08 20:06
bradford法，用酶标仪做，两个9应该没有问题的，做标曲我一般浓度从25-500μg/ml，分为7个浓度梯度，如果你要线性好一些，可以舍掉差异较大的高浓度点，取5点做标曲，最终只要你的蛋白浓度在标曲范围之内就行了。
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6楼2010-04-08 10:36:57
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qunbao62

银虫 (小有名气)
tommy6920(金币+1):那好，尽量要求接近三个9，谢谢罗 2010-04-08 20:07
引用回帖:
Originally posted by tommy6920 at 2010-04-08 09:22:53:
楼上，你做到三个九了吗？我看其他文献上野没有做到三个九的啊！！我也知道一般用紫外可见分光光度计都是要求达到三个九的。

呵呵 我做的时候一般要求995以上
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打酱油是一个态度，所谓的沉默的大多数，所谓的“非暴力不合作”；
7楼2010-04-08 11:33:18
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tommy6920

银虫 (小有名气)
4、5楼的说得不错，我一般都是做6个浓度点，测了几次，也都是达到两个9，只是有一个比较高一点，998，总之做得尽量接近三个9吧。非常感谢你们的意见！！！
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8楼2010-04-08 20:10:23
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nnhc

木虫 (正式写手)
tommy6920(金币+1): 2010-04-09 23:27
一般情况蛋白曲线做到3个9应该不难，只是文献上的标准曲线不是直线，不知道是做的问题还是体系问题，请关注一下！
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9楼2010-04-09 10:26:29
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tommy6920

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by nnhc at 2010-04-09 10:26:29:
一般情况蛋白曲线做到3个9应该不难，只是文献上的标准曲线不是直线，不知道是做的问题还是体系问题，请关注一下！

有些文献上是这么说的，我参考了几篇这类的文献，多数是说直线，我就按照这个来做了，可能是影响因素比较多，我都没有做到三个9，很是郁闷！谢谢啦...
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10楼2010-04-09 23:26:53
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