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tommy6920

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】考马氏亮蓝测定蛋白含量建立的标准曲线 已有5人参与

本人在用考马斯亮蓝测定蛋白质含量,要做标准曲线,文献上标准曲线不是直线,那么还要求相关系数达到三个9吗?有哪位虫友做过相关的实验,麻烦您给一下意见,不甚感激!!
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tommy6920

银虫 (小有名气)

怎么没人呢!!急啊...
2楼2010-04-06 09:45:14
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qunbao62

银虫 (小有名气)

tommy6920(金币+2):谢谢 2010-04-08 09:21
应该达到三个9,可根据测出的数据计算出回归方程
打酱油是一个态度,所谓的沉默的大多数,所谓的“非暴力不合作”;
3楼2010-04-06 11:07:29
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tommy6920

银虫 (小有名气)

楼上,你做到三个九了吗?我看其他文献上野没有做到三个九的啊!!我也知道一般用紫外可见分光光度计都是要求达到三个九的。
4楼2010-04-08 09:22:53
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pal2004

木虫 (正式写手)

tommy6920(金币+1): 2010-04-08 20:02
Bradford法估计能有两个9就不错了,我做的通常只有一个9,不过你看看10版药典就知道了,蛋白质含量测定法里根本就没有Bradford法。所以别对该法的精度抱太大期望,精度能接受就行,毕竟该法比较快捷。
5楼2010-04-08 10:27:14
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xyffly804

金虫 (初入文坛)

tommy6920(金币+1):谢谢! 2010-04-08 20:06
bradford法,用酶标仪做,两个9应该没有问题的,做标曲我一般浓度从25-500μg/ml,分为7个浓度梯度,如果你要线性好一些,可以舍掉差异较大的高浓度点,取5点做标曲,最终只要你的蛋白浓度在标曲范围之内就行了。
6楼2010-04-08 10:36:57
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qunbao62

银虫 (小有名气)

tommy6920(金币+1):那好,尽量要求接近三个9,谢谢罗 2010-04-08 20:07
引用回帖:
Originally posted by tommy6920 at 2010-04-08 09:22:53:
楼上,你做到三个九了吗?我看其他文献上野没有做到三个九的啊!!我也知道一般用紫外可见分光光度计都是要求达到三个九的。

呵呵 我做的时候一般要求995以上
打酱油是一个态度,所谓的沉默的大多数,所谓的“非暴力不合作”;
7楼2010-04-08 11:33:18
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tommy6920

银虫 (小有名气)

4、5楼的说得不错,我一般都是做6个浓度点,测了几次,也都是达到两个9,只是有一个比较高一点,998,总之做得尽量接近三个9吧。非常感谢你们的意见!!!
8楼2010-04-08 20:10:23
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nnhc

木虫 (正式写手)

tommy6920(金币+1): 2010-04-09 23:27
一般情况蛋白曲线做到3个9应该不难,只是文献上的标准曲线不是直线,不知道是做的问题还是体系问题,请关注一下!
9楼2010-04-09 10:26:29
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tommy6920

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by nnhc at 2010-04-09 10:26:29:
一般情况蛋白曲线做到3个9应该不难,只是文献上的标准曲线不是直线,不知道是做的问题还是体系问题,请关注一下!

有些文献上是这么说的,我参考了几篇这类的文献,多数是说直线,我就按照这个来做了,可能是影响因素比较多,我都没有做到三个9,很是郁闷!谢谢啦...
10楼2010-04-09 23:26:53
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