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【求助/交流】农杆菌介导的遗传转化问题请教,急!
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【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 jianhuafly 的 13 个金币
jianhuafly
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专业: 微生物生理与生物化学
[交流]
【求助/交流】农杆菌介导的遗传转化问题请教,急!
已有2人参与
本人做的农杆菌转化木本果树胚状体试验。
一般情况下,随着侵染时间的增加,GUS瞬时表达率会呈低-高-低。
我设置了4个时间梯度,15min,30min,45min,60min。在15min的时候比30min时GUS瞬时表达率要高,45min时GUS表达率最高,请问前者该如何解释啊?
老师说可能要从菌的生长特性来考虑。
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2010-04-05 02:14:33
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1949stone(金币+1): 2010-04-05 08:38
jianhuafly(金币+1):谢谢! 2010-04-05 11:30
感觉你试验设计的不够合理,4个时间梯度来就看侵染效率曲线不能反映真实情况,你可以从侵染5分钟开始,间隔5分钟,到60分钟做散点,看看会怎么样?
另外取样的农杆菌也一定要控制好OD值,保证不要摇过了。
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2010-04-05 08:18:37
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1949stone(金币+1): 2010-04-05 08:39
jianhuafly(金币+1):谢谢! 2010-04-05 11:30
一般情况10-15分钟是最好的,可以保证转基因的阳性率了,没大必要在第一步费时间。
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2010-04-05 08:20:21
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引用回帖:
Originally posted by
虫虫博士
at 2010-04-05 08:20:21:
一般情况10-15分钟是最好的,可以保证转基因的阳性率了,没大必要在第一步费时间。
因为我的受体是木本果树,时间短了可能不够啊
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4楼
2010-04-05 11:31:24
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