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hare1212

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为何SDS-PAGE浓缩胶不能把样品压成一条窄线? 已有9人参与

请教各位大侠,我最近做SDS-PAGE,但是问题百出,首先是浓缩胶并不能把我的样品压成一条线进入分离胶;其次是我每次跑的条带都有弥散的现象;还有就是我的条带总是不直,总是向边缘倾斜;我做了几次都是这样,不知道是何原因,郁闷中,请高手指点迷津!感激不尽!附上我的SDS-PAGE照片。
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hare1212

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by a09050074 at 2010-04-05 12:37:32:
我也没怎么做过,不过在想1。你的电压好像真的有点大了,建议调低电压(放小冰盒),电压不要超过100v  2。你跑胶的电泳液每次都换吗?最好每次都换一下。。

电泳液确实是反复用的,不过这次的是新配制的。下次准备降低电压,试试看。谢谢~
7楼2010-04-05 12:48:57
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angel2536

金虫 (著名写手)

★ ★
hare1212(金币+1): 2010-04-05 12:27
1949stone(金币+2): 2010-04-06 09:23
感觉弥散和歪有可能是电流过大,放热造成的。可以试下将其放在冰盒上试下,效果可能会好些的
2楼2010-04-05 10:58:13
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tangw_007

银虫 (小有名气)

★ ★
hare1212(金币+1): 2010-04-05 12:27
1949stone(金币+2): 2010-04-06 09:23
我建议你的浓缩胶用百分子五的,还有我觉得你的上样量有问题,上样液你也应该考虑考虑,在就是我觉得你上样时尽量对称平衡,尽量用中间的不要用两边的。
3楼2010-04-05 11:09:23
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hare1212

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by angel2536 at 2010-04-05 10:58:13:
感觉弥散和歪有可能是电流过大,放热造成的。可以试下将其放在冰盒上试下,效果可能会好些的

恩,确实电泳跑完有点温热的感觉,我再试试。还想请教为什么我的浓缩胶不能把样品压成一条直线呢?
4楼2010-04-05 12:29:25
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