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way2009way6860

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】跑电泳问题 已有6人参与

1.10%APS在4度 可以放多长时间?什么现象可以说明其变质了?
2.用浓度是0.5ug/mLEB染色,EB可以放多久?
谢谢
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

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司马诸葛(金币+1): 2010-04-04 23:11
引用回帖:
Originally posted by catherine_ at 2010-04-04 17:38:17:



囧。。。。我就采用这种方法,后染色,我还觉得把EB放胶里更不安全呢。。。。
EB挥发能有多厉害?染色的时候盖上盖子不就行了吗?

EB挥发能有多厉害,EB的物理性质就是强挥发性,盖盖子有用吗?瞬间开盖,就出来好多EB,一个分子插入DNA就可能引发移码突变,导致整个蛋白失去功能。
EB放在胶里,浓度可以是后染色的1/10,只要你将热好的胶换个容器,在低温的时候加入EB,这样保证不让EB在微波中煮沸,而且胶中的EB挥发量比溶液中小的多,大家觉得哪种方法更安全

加入胶中的EB量,是不会使胶看出有颜色变化的,就是一点也不会发红,而后染色用的EB溶液,颜色就是浅红色,或者有点发黄的,从视觉上就知道哪个更危险

[ Last edited by yujiaping1 on 2010-4-4 at 19:10 ]
8楼2010-04-04 19:04:53
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xuezhen

银虫 (小有名气)

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司马诸葛(金币+1): 2010-04-04 23:10
10%APS在4度 可以放一个月左右,最好现用现配,不知什么现象可说明,但是如果实验过程中出现胶很长时间都不凝固,那就有可能是它变质了。
EB好像可以放较长一段时间的,具体也没计算过,一般点MARKER,如果有带,那就可以用。
2楼2010-04-04 14:15:55
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

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司马诸葛(金币+1): 2010-04-04 23:10
我们长期放会放-20,半年不会坏,分装成小份,开启后放4度
EB只要肉眼看着黄黄的就继续能用,除非自己觉得染色效果不好了
那么就洗胶,配新的EB再染
3楼2010-04-04 16:29:51
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

还是不要用后染色的方法,EB挥发太可怕了,还是直接把EB放到胶里相对安全,能用EB替代物更好
4楼2010-04-04 16:41:07
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