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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】跑电泳问题
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way2009way6860

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】跑电泳问题 已有6人参与

1.10%APS在4度 可以放多长时间？什么现象可以说明其变质了？
2.用浓度是0.5ug/mLEB染色,EB可以放多久？
谢谢
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GO,GO,加油!
1楼 2010-04-04 11:52:08
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xuezhen

银虫 (小有名气)
★ ★
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司马诸葛(金币+1): 2010-04-04 23:10
10%APS在4度 可以放一个月左右，最好现用现配，不知什么现象可说明，但是如果实验过程中出现胶很长时间都不凝固，那就有可能是它变质了。
EB好像可以放较长一段时间的，具体也没计算过，一般点MARKER，如果有带，那就可以用。
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2楼2010-04-04 14:15:55
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
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司马诸葛(金币+1): 2010-04-04 23:10
我们长期放会放-20，半年不会坏，分装成小份，开启后放4度
EB只要肉眼看着黄黄的就继续能用，除非自己觉得染色效果不好了
那么就洗胶，配新的EB再染
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3楼2010-04-04 16:29:51
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
还是不要用后染色的方法，EB挥发太可怕了，还是直接把EB放到胶里相对安全，能用EB替代物更好
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4楼2010-04-04 16:41:07
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catherine_

木虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-04-04 16:41:07:
还是不要用后染色的方法，EB挥发太可怕了，还是直接把EB放到胶里相对安全，能用EB替代物更好

囧。。。。我就采用这种方法，后染色，我还觉得把EB放胶里更不安全呢。。。。
EB挥发能有多厉害？染色的时候盖上盖子不就行了吗？
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5楼2010-04-04 17:38:17
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1514132

至尊木虫 (著名写手)
★
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过硫酸铵只能放一周，时间长了就不好用了
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6楼2010-04-04 18:18:39
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1514132

至尊木虫 (著名写手)
EB配好后，放在4度冰箱里，密封保存，半年没事
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7楼2010-04-04 18:19:31
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
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司马诸葛(金币+1): 2010-04-04 23:11
引用回帖:
Originally posted by catherine_ at 2010-04-04 17:38:17:



囧。。。。我就采用这种方法，后染色，我还觉得把EB放胶里更不安全呢。。。。
EB挥发能有多厉害？染色的时候盖上盖子不就行了吗？

EB挥发能有多厉害，EB的物理性质就是强挥发性，盖盖子有用吗？瞬间开盖，就出来好多EB，一个分子插入DNA就可能引发移码突变，导致整个蛋白失去功能。
EB放在胶里，浓度可以是后染色的1/10，只要你将热好的胶换个容器，在低温的时候加入EB，这样保证不让EB在微波中煮沸，而且胶中的EB挥发量比溶液中小的多，大家觉得哪种方法更安全

加入胶中的EB量，是不会使胶看出有颜色变化的，就是一点也不会发红，而后染色用的EB溶液，颜色就是浅红色，或者有点发黄的，从视觉上就知道哪个更危险

[ Last edited by yujiaping1 on 2010-4-4 at 19:10 ]
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8楼2010-04-04 19:04:53
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
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scelab(金币+1):谢谢交流！:tiger06: 2010-04-05 18:17
我对EB在室温下的挥发性持保留意见
假设EB挥发性有那么强，那么染液应该很快失效，然而事实并不是如此，几个月都能染。
加入胶看不出红是因为胶本身的乳白色掩盖了而已，虽然染液中加的EB量确实大。
我觉得泡胶法是比预染法要安全，毕竟可以把EB污染区限制得更小，而已可以放在通风橱里面染
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9楼2010-04-04 23:40:34
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
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scelab(金币+1):谢谢交流！:tiger06: 2010-04-05 18:18
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-04-04 23:40:34:
我对EB在室温下的挥发性持保留意见
假设EB挥发性有那么强，那么染液应该很快失效，然而事实并不是如此，几个月都能染。
加入胶看不出红是因为胶本身的乳白色掩盖了而已，虽然染液中加的EB量确实大。
我觉得泡胶 ...

首先预染EB的浓度就是跑胶的1/10，再者更换容器的方法使得EB也不会扩大范围，整个制胶过程都是在通风橱内的，不会将EB弄到微波炉，这是绝对的
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10楼2010-04-05 10:32:58
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