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【求助】豆类直链与支链淀粉分离 已有3人参与
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你好，首先感谢您能浏览该帖！ 我做的工作是分离豆类原淀粉的直链与支链，根据文献报道应该采用正丁醇结晶法，但是我对这个方法是屡试全爽，要么就是分离出来很少要不就是根本出不来，不知道原因何在，请教大家指点一二！ 我的试验方法是：称取10g豆类淀粉，加入无水乙醇再加入氢氧化钠在沸水浴中搅拌20min，使溶液清澈透明，无结团状为止。以6000r/min高速离心15min，用盐酸中和，分别加入80mL 3：1（v/v）正丁醇-异戊醇的混合液在沸水浴中加热搅拌后冷却至室温，于4℃静置24h，取出高速离心15min得到的沉淀物为粗直链淀粉，离心液为粗支链淀粉。 将粗直链淀粉沉淀全部移入丁醇饱和的200mL水中，加热溶解至溶液透明， 冷却至室温后于4℃静置24h，取出离心15min，得沉淀物。将沉淀物再重复上述操作6次后，将沉淀物浸入无水乙醇24h，用无水乙醇洗涤数次，样品在40℃干燥10h，即得纯直链淀粉。 将粗支链淀粉加40mL 1：1（v/v）丁醇-异戊醇的混合液，于沸水浴中加热搅拌10min，冷却后于4℃静置48h，离心15min。离心液真空浓缩至原体积的一半后在离心液中缓缓加入二倍体积的无水乙醇，以4800r/min离心15min。将沉淀物溶于200ml 0.2mol/L氢氧化钠溶液 依上述方法纯化2次，用无水乙醇脱水洗涤，样品在40℃干燥10h，即得纯支链淀粉。 |
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3楼2010-04-06 10:42:17
king9089
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