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moonway111

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】同源克隆相关

我现在正在做同源克隆,由于兼并性较强,同源性太差,只能勉强找到一对同源引物,并且该基因是负调控基因。请各位前辈、高手给以指点。

退货温度怎么选择?Touch Down 之后的温度如何选择?原则是什么?
需要热启动吗?
引物浓度如何选择?
延伸时间过长,会有何影响?
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能喝半斤喝八两,这样的干部要培养;能喝八两喝半斤,这样的干部不放心。
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人

★ ★ ★
amisking(金币+3): 2010-04-01 13:46
moonway111(金币+3): 2010-04-12 22:59
moonway111(金币+3): 2010-05-10 18:10:44
好复杂。

退火温度按照正常先。touch down的,一般2-3°一个梯度。
热启动?需要的吧。(不确定)
浓度正常,25.
延伸时间...最好控制下,因为有可能误配的地方造成很大影响
小木虫之有关部门负责人
2楼2010-04-01 13:44:42
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