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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】同源克隆相关
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【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 moonway111 的 4 个金币

moonway111

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】同源克隆相关

我现在正在做同源克隆，由于兼并性较强，同源性太差，只能勉强找到一对同源引物，并且该基因是负调控基因。请各位前辈、高手给以指点。

退货温度怎么选择？Touch Down 之后的温度如何选择？原则是什么？
需要热启动吗？
引物浓度如何选择？
延伸时间过长，会有何影响？
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能喝半斤喝八两，这样的干部要培养；能喝八两喝半斤，这样的干部不放心。
1楼 2010-04-01 11:03:22
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
★ ★ ★
amisking(金币+3): 2010-04-01 13:46
moonway111(金币+3): 2010-04-12 22:59
moonway111(金币+3): 2010-05-10 18:10:44
好复杂。

退火温度按照正常先。touch down的，一般2-3°一个梯度。
热启动？需要的吧。（不确定）
浓度正常，25.
延伸时间...最好控制下，因为有可能误配的地方造成很大影响
赞一下(1人) 回复此楼
小木虫之有关部门负责人
2楼2010-04-01 13:44:42
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