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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有关AFLP酶切和连接后保温温度
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niemingyu

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有关AFLP酶切和连接后保温温度

做过AFLP的童鞋，偶有个小问题，我用的是北京鼎国的AFLP试剂盒，说明上表示在酶切和连接过程中，37度保温5h，8度保温4h,再于4度过夜，但我们实验条件有限，没有8度环境，老板说37后直接放4度冷藏就行，我想问下这样真的可以么？会不会影响后续扩增和电泳啊？很怀疑这事，希望各位大虾给点指导意见，多黑多黑~~~！
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1楼 2010-04-01 08:42:41
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
amisking(金币+1): 2010-04-01 11:59
niemingyu(金币+1): 2010-04-02 18:11
放在四度过夜应该没有问题，8度只是相对严格的要求，一般的培养箱会有8度，你找找实验室的培养箱，很多都带制冷功能
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4楼2010-04-01 10:17:08
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purplerain2586

金虫 (小有名气)
★
amisking(金币+1): 2010-04-01 11:59
我们酶切后，马上回收，回收好了，直接放到负20°冰箱里保存！没有你说的这种情况。
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2楼2010-04-01 09:30:31
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purplerain2586

金虫 (小有名气)
连接好了，也是要放到负20°保存的！什么时候用拿出来就是了！
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3楼2010-04-01 09:31:21
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lansha8331

无虫 (小有名气)
★
amisking(金币+1): 2010-04-01 12:00
niemingyu(金币+1): 2010-04-02 18:11
这试剂盒是酶切连接一步走的啊，我当时是两步分开做的，37度酶切两个小时，22度连接过夜，然后就放4度保存备用了。。。
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5楼2010-04-01 11:15:32
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