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niemingyu

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有关AFLP酶切和连接后保温温度

做过AFLP的童鞋,偶有个小问题,我用的是北京鼎国的AFLP试剂盒,说明上表示在酶切和连接过程中,37度保温5h,8度保温4h,再于4度过夜,但我们实验条件有限,没有8度环境,老板说37后直接放4度冷藏就行,我想问下这样真的可以么?会不会影响后续扩增和电泳啊?很怀疑这事,希望各位大虾给点指导意见,多黑多黑~~~!
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purplerain2586

金虫 (小有名气)


amisking(金币+1): 2010-04-01 11:59
我们酶切后,马上回收,回收好了,直接放到负20°冰箱里保存!没有你说的这种情况。
2楼2010-04-01 09:30:31
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purplerain2586

金虫 (小有名气)

连接好了,也是要放到负20°保存的!什么时候用拿出来就是了!
3楼2010-04-01 09:31:21
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


amisking(金币+1): 2010-04-01 11:59
niemingyu(金币+1): 2010-04-02 18:11
放在四度过夜应该没有问题,8度只是相对严格的要求,一般的培养箱会有8度,你找找实验室的培养箱,很多都带制冷功能
4楼2010-04-01 10:17:08
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lansha8331

无虫 (小有名气)


amisking(金币+1): 2010-04-01 12:00
niemingyu(金币+1): 2010-04-02 18:11
这试剂盒是酶切连接一步走的啊,我当时是两步分开做的,37度酶切两个小时,22度连接过夜,然后就放4度保存备用了。。。
5楼2010-04-01 11:15:32
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niemingyu

铜虫 (小有名气)

★ ★
amisking(金币+2): 2010-04-01 12:00
酶切连接是一步完成的,我们这没有制冷功能的培养箱,最低温度就室温了,所以担心如果不经过8度保温,连接效果会受影响,多谢各位童鞋~
6楼2010-04-01 11:33:22
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