24小时热门版块排行榜    

查看: 1079  |  回复: 8
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

gdongli8325

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】real-time PCR 产物长度

要做real-time PCR了,设计了引物,产物长度接近250bp。根据参考资料只要在300bp内都是可用的。但是今天导师的意思是重新设计引物,要在150bp左右,因为actin的长度是159bp。虫虫中肯定有做过的,不知道250bp的长度是否会影响结果?我实在不想重新设计引物,因为又要等一周。在此请教了。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

angel2536

金虫 (著名写手)

★ ★
amisking(金币+2): 2010-03-31 11:41
gdongli8325(金币+1): 2010-03-31 14:30
感觉没必要吧,150bp左右只是与内参尽量在扩增条件上保持一致,更加严格。
我们做miRNA在60bp左右,用U6做内参,其为80bp,也可以用的
3楼2010-03-31 09:51:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

yujiaping1

木虫 (著名写手)


amisking(金币+1): 2010-03-31 11:41
你用的是染料法,还是探针法,探针法长度是在50-150bp
2楼2010-03-31 09:11:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mourning

木虫 (正式写手)

看你机器的说明书,会有的!!!
4楼2010-03-31 11:23:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


amisking(金币+1): 2010-03-31 11:42
gdongli8325(金币+1): 2010-03-31 14:30
没有必要,其实只要是同一个基因之间比较,是没有必要考虑扩增效率的
5楼2010-03-31 11:38:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见