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mzqpony

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】反向PCR引物设计

那位虫友可以详细介绍一下反向PCR怎样设计引物,如果我已同源扩增出一段已知序列:GCGTGAGGCAGACCCTATCCGCGCCGACCGGGACTACGTGGTGCAGCTGTCCGACTGGACCGACGAAGACCCCATGCGGGTGCTCGCCAAGCTCAAGGTGCAGAGCGACTACTACAACTACCACCAGCCGACGGCCATTGACTTCTTCCGCGACGTCGCCGACATGGGGCTTTCCCGCGCACTCGACAAGCGTGCGATGTGGAACCAGATGCGGATGAACCCGACCGATCTGGCCGATCTCTCGGGGGCGACATTGACCTACCTGATGAACGGCGTCACCCCTGCCGGC
想用反向PCR扩增全长,是否可行。如果行 ,怎样设计反向PCR引物,望给俺指导一下详细过程。谢谢!
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mzqpony

金虫 (正式写手)

这是我从细菌中同源扩增出的部分抗铜基因片断,能根据这段片断扩增出全长吗?
4楼2010-03-30 23:40:26
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

mzqpony(金币+1):谢谢 2010-03-31 17:01
什么意思,想扩增全长,两边都不是头?不明白,这个是一个基因的一段序列吗?
2楼2010-03-30 11:06:48
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

mzqpony(金币+1):谢谢 2010-03-31 17:01
你去查一下inverse PCR的原理,你就会设计方向PCR的引物了,一般用nested PCR做方向PCR
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
5楼2010-03-30 23:44:39
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angel2536

金虫 (著名写手)

mzqpony(金币+1):谢谢 2010-03-31 17:02
根据你所说的,扩初一段序列再进行反向PCR,以这段序列设计引物进行反向扩增,那就是5'RACE了。
你可以上网上收下RACE的原理,祝好运
6楼2010-03-31 10:06:02
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