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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助/交流】反向PCR引物设计
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mzqpony

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】反向PCR引物设计

那位虫友可以详细介绍一下反向PCR怎样设计引物，如果我已同源扩增出一段已知序列：GCGTGAGGCAGACCCTATCCGCGCCGACCGGGACTACGTGGTGCAGCTGTCCGACTGGACCGACGAAGACCCCATGCGGGTGCTCGCCAAGCTCAAGGTGCAGAGCGACTACTACAACTACCACCAGCCGACGGCCATTGACTTCTTCCGCGACGTCGCCGACATGGGGCTTTCCCGCGCACTCGACAAGCGTGCGATGTGGAACCAGATGCGGATGAACCCGACCGATCTGGCCGATCTCTCGGGGGCGACATTGACCTACCTGATGAACGGCGTCACCCCTGCCGGC
想用反向PCR扩增全长，是否可行。如果行 ，怎样设计反向PCR引物，望给俺指导一下详细过程。谢谢！
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1楼 2010-03-30 09:08:42
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
mzqpony(金币+1):谢谢 2010-03-31 17:01
什么意思，想扩增全长，两边都不是头？不明白，这个是一个基因的一段序列吗？
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2楼2010-03-30 11:06:48
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
mzqpony(金币+1):谢谢 2010-03-31 17:02
什么物种
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3楼2010-03-30 11:37:25
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mzqpony

金虫 (正式写手)
这是我从细菌中同源扩增出的部分抗铜基因片断，能根据这段片断扩增出全长吗？
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4楼2010-03-30 23:40:26
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
mzqpony(金币+1):谢谢 2010-03-31 17:01
你去查一下inverse PCR的原理，你就会设计方向PCR的引物了，一般用nested PCR做方向PCR
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
5楼2010-03-30 23:44:39
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angel2536

金虫 (著名写手)
mzqpony(金币+1):谢谢 2010-03-31 17:02
根据你所说的，扩初一段序列再进行反向PCR，以这段序列设计引物进行反向扩增，那就是5'RACE了。
你可以上网上收下RACE的原理，祝好运
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6楼2010-03-31 10:06:02
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