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_truman_

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】请教做脂质体的 已有12人参与

不知道有没有人做脂质体的?各位的磷脂都是用的什么公司的?
本人用的磷脂是国药的卵磷脂。每次制备好的样品液,离心之后都有大量的沉淀在离心管底部,肯定不是药物,因为药物没那么多!怀疑是磷脂的纯度问题,会不会是因为磷脂的电性影响了脂质体的稳定性,造成每次离心的时候都会有大量沉降?
请各位解答一下!谢谢!
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_truman_

银虫 (小有名气)

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Originally posted by 小牛儿 at 2010-03-29 19:21:16:
我们实验室用的都是国外的。不过就算是国药的应该也不会出现你的问题。你可以先做一个 空白脂质体,看离心后是不是还有沉淀。如果还有 说明的确是你磷脂的问题 。带电荷的磷脂一般会起到稳定作用,因此不会是磷脂 ...

受教了!电荷的确不会产生沉淀!但是不知道磷脂的纯度会不会产生影响呢?
不知道能不能把你们实验室的磷脂厂家说一下呢?
5楼2010-03-30 16:37:36
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_truman_

银虫 (小有名气)

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Originally posted by xyffly804 at 2010-03-29 19:23:50:
首先要考虑你的脂质体粒径多大,你的离心转速是多少,如果脂质体比较大,也是容易被离心沉淀的

脂质体每次水化之后都超声的,应该粒径不会很大!转速在2500rpm!
6楼2010-03-30 16:39:38
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_truman_

银虫 (小有名气)

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Originally posted by xiaoyan5861 at 2010-03-30 15:51:14:
能问下你的磷脂是粉末状还是膏状的呀?我买的大豆磷脂是口服级别黄色膏状,每次称量时感觉不是很准确

买的国药的卵磷脂是那种膏状的,粘巴拉基的!我每次称的时候是用两个勺像刮糖球一样的,搓成球状之后,让它自己往放在天平上的烧杯壁上粘的!你买的磷脂是在哪家公司买的呀?方便透露下不?
7楼2010-03-30 16:43:48
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银虫 (小有名气)

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Originally posted by zl0921516 at 2010-03-31 16:34:49:

我觉得不应该是纯度的问题,我用过2种差别很大的磷脂,一种是大豆磷脂,含量80%左右,sigma-P5638,还有一种是DSPC,含量大于98%,Genzyme出品的,但是制备后都会有沉淀,(仅以薄膜分散法为例),所以应该是其 ...

我正是用的薄膜分散法制备的!也不知道到底是什么原因?交流下!
10楼2010-04-02 21:43:52
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_truman_

银虫 (小有名气)

为什么脂质体的样品制备会出现如此多的偏差呢?重现性是如此的差!
能人都来交流下!
11楼2010-04-05 21:44:01
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_truman_

银虫 (小有名气)

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Originally posted by zl0921516 at 2010-04-09 19:15:47:
我将DSPC和胆固醇以摩尔比2:1 溶于氯仿和甲醇混合溶液(v/v=2/1),在55摄氏度旋蒸成膜,然后用120毫摩尔每升的醋酸钙溶液水化洗膜,洗下来后,有非常多的沉淀,我不知道是不是电荷的原因。

你是一洗完就有还是洗完之后,放置段时间才有?
13楼2010-04-10 14:57:18
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银虫 (小有名气)

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Originally posted by zl0921516 at 2010-04-11 21:59:56:
一洗下来是很浓的混悬液,放置一段时间有不少沉淀。感觉浓度比我拿普通大豆磷脂做的大很多。

不知道你是用的水洗液体积是多少的?沉淀的原因我看书原因有很多种!有磷脂氧化的(对于卵磷脂而言)的原因,有粒径大的原因,有浓度大的原因!所以这个又不好说!
你不妨把各种条件都优化下,像水洗液体积尽量大点,使脂质体浓度低点!
或者做完之后,用微孔滤膜过滤下!我昨天就做了份样,一份过滤了,一份没过滤的,今天看的时候,明显过滤的情况好点!
15楼2010-04-12 16:33:17
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_truman_

银虫 (小有名气)

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Originally posted by zl0921516 at 2010-04-12 17:24:21:

我用的10ml水溶液水化的,可能浓度是有点大。
你过膜的是为了除去没有水化的固体吗?还是匀化?
用的是多大孔径的滤膜呢?

过膜主要还是匀化!孔径主要看你的脂质体大小的!如果做得很大,硬要用小的过的话,会造成脂质体破裂的!
17楼2010-04-12 22:04:06
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_truman_

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by pupuly at 2010-05-25 00:24:37:


我买的是大豆卵磷脂,黄色粉末状,称起来比较方便,如果需要的话明天可以去实验室看看哪个厂家的。

多谢多谢!能把沉得这么深的帖子挖出来,真是难为你了!
20楼2010-05-25 21:30:19
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