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vs570588

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于50μl体系的PCR加入DNA模板的量意味

我们PCR试剂全用的宝生物的,自己提的微生物DNA,每次都是加1μl的DNA,也不知道浓度。大家说有必要定量DNA吗?
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


1949stone(金币+1):我也是 2010-03-28 07:50
只要PCR能出结果,就不用定量了,一般我们都是跑浓度梯度,很少定量
2楼2010-03-27 22:54:28
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vs570588

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-03-27 22:54:28:
只要PCR能出结果,就不用定量了,一般我们都是跑浓度梯度,很少定量

但是这样跑出的条带老出现各种各样的问题,有时条带亮,有时没有,有时拖尾严重,有时有引物二聚体。你说的跑浓度梯度,是加入DNA不同的体积,最好定个最佳体积吗?
3楼2010-03-28 20:03:22
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shuwenying

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
要看你们提取出来的DNA的量了,只要电泳跑出来条带够量就行了,反正这些只是定性的实验,能满足实验要求就可以了,如果实在看不清楚,可以试试加2uL或者3uL
4楼2010-03-29 09:15:18
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