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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于50μl体系的PCR加入DNA模板的量意味
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vs570588

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于50μl体系的PCR加入DNA模板的量意味

我们PCR试剂全用的宝生物的，自己提的微生物DNA,每次都是加1μl的DNA，也不知道浓度。大家说有必要定量DNA吗？
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1楼 2010-03-27 22:15:26
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
1949stone(金币+1):我也是 2010-03-28 07:50
只要PCR能出结果，就不用定量了，一般我们都是跑浓度梯度，很少定量
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2楼2010-03-27 22:54:28
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vs570588

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-03-27 22:54:28:
只要PCR能出结果，就不用定量了，一般我们都是跑浓度梯度，很少定量

但是这样跑出的条带老出现各种各样的问题，有时条带亮，有时没有，有时拖尾严重，有时有引物二聚体。你说的跑浓度梯度，是加入DNA不同的体积，最好定个最佳体积吗？
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3楼2010-03-28 20:03:22
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shuwenying

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
要看你们提取出来的DNA的量了，只要电泳跑出来条带够量就行了，反正这些只是定性的实验，能满足实验要求就可以了，如果实在看不清楚，可以试试加2uL或者3uL
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4楼2010-03-29 09:15:18
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