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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR产物电泳图变形的问题
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以诺9070

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR产物电泳图变形的问题

对PCR产物进行电泳分析，发现目的条带变形明显，而marker不受影响。电泳设置的条件100v，100mA，新更换的电泳液，开始时电压为100V，电泳1小时后，电压为90V。
是电泳液的问题吗？还是含有蛋白、点样没弄好的缘故？
如果是电泳液的问题，是否说明我的药品不合格呢？
多谢了



[ Last edited by 以诺9070 on 2010-3-23 at 18:26 ]
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1楼 2010-03-23 18:21:56
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spiderboy

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这明显就是胶的问题，胶的浓度不均匀。重新换下缓冲液，重新配胶。
还有要保证胶口平整，不平也会跑歪的。
这种情况我遇多了
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9楼2010-03-23 22:58:52
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
1：是不是pcr没有完全啊？感觉条带既不规则~
2:你是用100V 1小时吗？ 你们实验室都是这样的条件吗？按理说电压大一半时间应该设短一些啊？
3：你pcr产物多大？
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2010-03-23 18:29:19
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以诺9070

金虫 (小有名气)
PCR产物就应该和marker最上面的条带一样大。
是100V跑的电泳，跑了半个小时曾拿出来看了一下，后来又放回去接着跑的。

第一次跑，不知道应该用多大电压、多长时间。有些同学就用100V
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3楼2010-03-23 18:39:50
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hong303030

金虫 (小有名气)
以诺9070(金币+2):有道理，谢谢 2010-03-23 19:40
是胶的问题吧，或者是PCR体系配置的时候药品没有完全融化，然后就配体系跑PCR了，建议用80V，跑30min,试试
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4楼2010-03-23 19:08:48
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