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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR出来只有引物二聚体，我该怎么办呢？
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陈思容

铜虫 (正式写手)
引物不长，我的引物30bp都P出来了呢！最近用pfu酶P，也是在最前端有引物二聚体，没有主带，先提高退火温度3°试试看，我一般都是做65-55°的降落PCR
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11楼2010-03-24 14:33:11
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Niclo2008

新虫 (初入文坛)
★
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只有引物二聚体，说明引物没有结合上去，可能退火温度太高了，或是引物特异性不好，可从这两方面改进一下。
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12楼2010-03-24 20:23:02
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xiaogang0909

金虫 (正式写手)
★
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PCR本来就的摩条件 哪有那么轻易 卡可卡卡可  就扩初来了
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13楼2010-03-25 09:49:19
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nick.nye-0313

铜虫 (小有名气)
★
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怀疑你东西搞错了，要不就是没有加！
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只为成功找方法
14楼2010-03-25 15:35:27
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libostar

金虫 (正式写手)
★
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引物设计，退火温度
DNA模板稀释和纯化过吗？
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15楼2010-03-25 23:46:52
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微笑漩涡

新虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
touch down PCR 扩增一次吧，呵呵
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16楼2010-03-26 00:09:54
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csjiang1123

木虫 (小有名气)
你确定是引物二聚体吗？你扩增的片段多大？
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17楼2010-03-28 22:49:55
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shwjs88

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
建议升高退火温度，一般升高退火温度可以解决引物二聚体的问题，再就是检查你的引物的特异性是否合适。祝顺利！
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18楼2010-04-01 14:35:06
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siben

铜虫 (小有名气)
★
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引物长短没问题的，我的引物27的都有，可能是特异性不强吧，P不出条带来，你可以到NCBI上Blast下，看下特异性怎么样？
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最近很困惑！
19楼2010-04-01 21:13:06
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