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yucheng9255

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】PCR出来只有引物二聚体,我该怎么办呢?

我的模板序列
ATGGGAAAAGTTGCGGTGGGAGCAGCAGTGATAGGGGCGGCCGCGGTGGTGGCCGTCACG
GCTTACATCGTCCGCCGCCGCATGCGGTGCGCGAACGGCAGGGTAAAGGCAATGGAGATT
GTGAAGGACTTCGAGGAGGATTGTGCAACCTCGTATTCTAAGCTGAAGCATGTGGCCGAT
GCTATGACTGTGGAGATGCACGCGGGCCTTGCTTCCGAAGGTGGAAGCAAGCTCAAGATG
CTGATCAGCTATGTGGATAATCTACCAACTGGAGATGAGAAAGGATTGTTTTATGCATTG
GACCTTGGTGGAACAAACTTTCGTGTGTTGCGGGTACAATTGGGAGGAAGGGATGGGCGC
ATTGTTAATCAGGAATTTGTTGAGGTGTCGATTCCTCCAAATTTGATGGTTAAGAGTACA
GATGCACTGTTTGACTATATTGCAACTGAACTTGCAAAATTTGTTGCTAAAGAAGGCCCA
GGTTTTCATCTTCCACCTGGTAGGCAGAGGGAACTAGGTTTTACCTTCTCCTTCCCTGTG
ATGCAAACATCAATCAACTCTGGGAATCTTATTAAGTGGACCAAAGGGTTCTCCATAGAT
GATACGATTGGCCGAGACGTGGTGGCAGAATTAACAAAGGCCATAGAAAGAAAAGGCGTT
GATATGCGTGTGTCAGCTCTTGTCAATGATACAATTGGAACACTAGCTGGAGGTAGATAC
TTCAACGATGATGTTGTTGTTGCCGTGATTTTGGGCACTGGATCTAATGCAGCATATGTG
GAACGTGCACAAGCCATACCAAAATGGCAGGGTCTTCTACCTAAATCAGGAGATATGGTT
ATCAACATGGAGTGGGGCAACTTTAGGTCATCACATCTACCATTAACAGAGTATGACCGT
GCAATGGATATTGATAGTTTAAACCCTGGTGAACAGATTTTTGAGAAGCTAGTTTCTGGC
ATGTATTTGGGCGAAATTTTGCGTAGAGTCCTACTCAGGATGGCTGAAGAAGCTGCCTTT
TTTGGTGCCACTGTTCCACCAAAACTTAAAATTCCATTCATATTGAGGACACCTGACATG
TCATCCATGCATCATGACACATCAGTCAATCTCAAAGTGGTTGGGATCAAAATGAAGGAG
ATTTTAGGGATATCTGACACCCCCCTGAAGATGAGAAAAATTGTTGTTCAACTCTGCAAC
ATTGTAGCCACACGTGGGGCTCGCCTTGCGGCTGCTGCTATCTTCGGAGTTCTGAAGAAA
ATGGGCAGAGATACAGTCAGGCCTGGAGAGAAACAGAAGACTGTCATCGCCATGGATGGT
GGATTGTTTGAGCACTACAGTGAGTACAGTAAGTGCTTGGAAAACACACTGAGAGAATTG
GTTGGGGAGCAAGTTTCAGAGAGCCTCTTCATTGAGCATGCCAATGATGGCTCAGGCATT
GGAGCTGCCCTTCTTGCTGCCTCTCATTCCCAGTACATTGGGGTAGAAGAGTCCTGA

我的引物:
R:TCATCTATGGAGAACCCTTTGG
F:GATTGTGAAGGACTTCGAGGAG


[ Last edited by yucheng9255 on 2010-3-23 at 15:47 ]
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shwjs88

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议升高退火温度,一般升高退火温度可以解决引物二聚体的问题,再就是检查你的引物的特异性是否合适。祝顺利!
18楼2010-04-01 14:35:06
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查看全部 19 个回答

lansha8331

无虫 (小有名气)

写错了,是引物太多了
3楼2010-03-23 17:20:03
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自强1

禁言 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
本帖内容被屏蔽

4楼2010-03-23 17:21:42
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hong303030

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是的引物太长,15个碱基左右就可以
5楼2010-03-23 19:11:38
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