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zzCTGU

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于种子液生长曲线测定和发酵时间控制问题

我想测定种子液的生长曲线,从而判断最佳的接种量,我想用干重法,但往往测定不是很准,误差较大,用吸光度法的话,因为我用孢子悬浮液接到种子瓶里的,长出来的种子都是球状的,比较大,我怕吸光度法也不准。还有是不是每个不同的测定时间要用不同的瓶子啊,可以用同一瓶子不同的时间取样么。
     还有关于发酵的放瓶时间问题,有两个方案,一是先做个基础发酵,确定最佳发酵时间,然后所有的优化实验都以这个时间为放瓶标准。二是(举个例子说明)我优化碳源中的葡萄糖(3%  5%  7%  9%)  蔗糖(3%  5%  7%  9%),每个不同的浓度都在24,48,72,96h时测定,那样的话瓶子要很多,工作量大,并且要是我最后确定的是葡萄糖5%72h时最佳,而蛋白胨0.5%96h最佳,那这个时间就不好统一了。所以我很矛盾,请教各位大虾,有没什么建议或更好的方法,谢谢啦
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nkdboy

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
首先,你培养相同时间后各瓶的菌球数量有没有明显差别,这儿就有问题的话再测生物量就没有意义了。吸光度法肯定不行的,菌球液不是均匀的体系。对于真菌,一般做生长曲线只能用生物量,一批接几十个瓶子,每个时期取5瓶测湿重,而且湿重数据误差10%以内没有问题。不能在同一个瓶子里取样。
     后面这个问题没有捷径,大量瓶子做,然后响应面分析。
4楼2010-04-02 21:19:49
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huangdi5217

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
干重不准可以尝试用血球计数板计数的方法。应该用同一瓶子的不同时间取样,但是如果每次取样太多就影响最后的测定,可以考虑做几个平行。至于放罐时间的确定这个需要由你自己权衡决定,确定出最优时间
2楼2010-03-24 09:10:58
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bigvigor


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
别怕麻烦,每一步要慎重,尽量少的误差,做重复试验,或响应面分析,包括误差分析,试验也少,优化结果也很精确
3楼2010-03-29 10:24:09
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