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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于种子液生长曲线测定和发酵时间控制问题
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zzCTGU

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于种子液生长曲线测定和发酵时间控制问题

我想测定种子液的生长曲线，从而判断最佳的接种量，我想用干重法，但往往测定不是很准，误差较大，用吸光度法的话，因为我用孢子悬浮液接到种子瓶里的，长出来的种子都是球状的，比较大，我怕吸光度法也不准。还有是不是每个不同的测定时间要用不同的瓶子啊，可以用同一瓶子不同的时间取样么。
     还有关于发酵的放瓶时间问题，有两个方案，一是先做个基础发酵，确定最佳发酵时间，然后所有的优化实验都以这个时间为放瓶标准。二是(举个例子说明)我优化碳源中的葡萄糖（3%  5%  7%  9%）  蔗糖（3%  5%  7%  9%），每个不同的浓度都在24，48，72，96h时测定，那样的话瓶子要很多，工作量大，并且要是我最后确定的是葡萄糖5%72h时最佳，而蛋白胨0.5%96h最佳，那这个时间就不好统一了。所以我很矛盾，请教各位大虾，有没什么建议或更好的方法，谢谢啦
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1楼 2010-03-22 15:45:34
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huangdi5217

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
干重不准可以尝试用血球计数板计数的方法。应该用同一瓶子的不同时间取样，但是如果每次取样太多就影响最后的测定，可以考虑做几个平行。至于放罐时间的确定这个需要由你自己权衡决定，确定出最优时间
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2楼2010-03-24 09:10:58
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bigvigor

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
别怕麻烦，每一步要慎重，尽量少的误差，做重复试验，或响应面分析，包括误差分析，试验也少，优化结果也很精确
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3楼2010-03-29 10:24:09
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nkdboy

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
首先，你培养相同时间后各瓶的菌球数量有没有明显差别，这儿就有问题的话再测生物量就没有意义了。吸光度法肯定不行的，菌球液不是均匀的体系。对于真菌，一般做生长曲线只能用生物量，一批接几十个瓶子，每个时期取5瓶测湿重，而且湿重数据误差10%以内没有问题。不能在同一个瓶子里取样。
     后面这个问题没有捷径，大量瓶子做，然后响应面分析。
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4楼2010-04-02 21:19:49
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