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linyekexue

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】土壤酸性磷酸酶 已有6人参与

最近在做土壤酶活性方面的实验时发现:测定土壤酸性磷酸酶时,应用的比色法,每次做的样品怎么都不显色。起初认识是自己操作的问题,然后重新的做了一遍,可是结果仍旧——没有显色;接着怀疑了显色剂的好坏(第一次用时可以的,有另外的买新的)结果还是一样——没有显色;后来,为了避免操作等的问题,就与同学一块做了下,结果还是没有显色。经过讨论与查文献,感觉是温度或pH的问题,就有做了2边,结果在精确测定的pH下没有显色,温度做了3个,一个是处理好后室内放置15度左右,另外2个放置于37度的培养箱内,结果室内放置的仍旧没有显色,培养箱的2个在24小时内居然显色了,但是2个处理不同的,一个是加水的,一个是加硫酸铝的,测定比色值后,加水的仅为0.009左右的,而家硫酸铝的却为0.345左右的。2者质量一样的(5g)。而做中性与碱性磷酸酶时候却可以显色的。(土壤样品为喀斯特土壤)
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红豆汤水

铜虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
gaofeng925(金币+1): 积极 2011-12-30 08:22:52
理论上室温上是不行的,酶都会再某一温度下活性最高,之前做过,在37度下培养24小时,显色效果很好~~
9楼2011-10-14 17:07:54
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普通回帖

黑眼圈

铜虫 (小有名气)


linyekexue(金币+1):谢谢参与
有深度,应该是温度影响的,或者是空气中的因素
考研完了。。
2楼2010-03-21 22:00:42
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linyekexue

金虫 (正式写手)

可能是吧
3楼2010-03-21 23:11:45
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naunancy

用PNPP法
4楼2010-03-24 08:48:53
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minryb

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by linyekexue at 2010-03-21 19:12:34:
最近在做土壤酶活性方面的实验时发现:测定土壤酸性磷酸酶时,应用的比色法,每次做的样品怎么都不显色。起初认识是自己操作的问题,然后重新的做了一遍,可是结果仍旧——没有显色;接着怀疑了显色剂的好坏(第一 ...

帮顶,想知道具体原因
5楼2010-04-17 19:26:14
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sun_

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
gaofeng925(金币+1):鼓励新虫 2010-07-19 09:29:19
用PNPP法 ,注意一下配通用缓冲液的药品使用是否正确
做自己该做的
6楼2010-07-18 23:54:54
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suifuqing110

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
那后来怎么办呢??我现在测定时也遇到了同样的问题  昨天晚上做的  现在还没倒  正在保温箱里放着了   那现在还能测吗?  还准确嘛?
7楼2011-10-14 11:18:28
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linyekexue

金虫 (正式写手)

准确性在室温下应该是可以的,最好换另外一种方法,那个显色很明显
8楼2011-10-14 16:57:52
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linyekexue

金虫 (正式写手)

我说的意思是他的室温是25度,但是在40度的话显色也是很好的,所以说有时这个东西还真不好说。
10楼2011-10-15 11:59:54
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