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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 环境 » 环境生态 » 【求助】土壤酸性磷酸酶
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linyekexue

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】土壤酸性磷酸酶 已有6人参与

最近在做土壤酶活性方面的实验时发现：测定土壤酸性磷酸酶时，应用的比色法，每次做的样品怎么都不显色。起初认识是自己操作的问题，然后重新的做了一遍，可是结果仍旧——没有显色；接着怀疑了显色剂的好坏（第一次用时可以的，有另外的买新的）结果还是一样——没有显色；后来，为了避免操作等的问题，就与同学一块做了下，结果还是没有显色。经过讨论与查文献，感觉是温度或pH的问题，就有做了2边，结果在精确测定的pH下没有显色，温度做了3个，一个是处理好后室内放置15度左右，另外2个放置于37度的培养箱内，结果室内放置的仍旧没有显色，培养箱的2个在24小时内居然显色了，但是2个处理不同的，一个是加水的，一个是加硫酸铝的，测定比色值后，加水的仅为0.009左右的，而家硫酸铝的却为0.345左右的。2者质量一样的（5g）。而做中性与碱性磷酸酶时候却可以显色的。（土壤样品为喀斯特土壤）
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1楼 2010-03-21 19:12:34
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

红豆汤水

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
gaofeng925(金币+1): 积极 2011-12-30 08:22:52
理论上室温上是不行的，酶都会再某一温度下活性最高，之前做过，在37度下培养24小时，显色效果很好~~
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9楼2011-10-14 17:07:54
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普通回帖

黑眼圈

铜虫 (小有名气)
★
linyekexue(金币+1):谢谢参与
有深度，应该是温度影响的，或者是空气中的因素
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考研完了。。
2楼2010-03-21 22:00:42
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linyekexue

金虫 (正式写手)
可能是吧
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3楼2010-03-21 23:11:45
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naunancy

用PNPP法
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4楼2010-03-24 08:48:53
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minryb

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by linyekexue at 2010-03-21 19:12:34:
最近在做土壤酶活性方面的实验时发现：测定土壤酸性磷酸酶时，应用的比色法，每次做的样品怎么都不显色。起初认识是自己操作的问题，然后重新的做了一遍，可是结果仍旧——没有显色；接着怀疑了显色剂的好坏（第一 ...

帮顶，想知道具体原因
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5楼2010-04-17 19:26:14
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sun_

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
gaofeng925(金币+1):鼓励新虫 2010-07-19 09:29:19
用PNPP法 ，注意一下配通用缓冲液的药品使用是否正确
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做自己该做的
6楼2010-07-18 23:54:54
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suifuqing110

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
那后来怎么办呢？？我现在测定时也遇到了同样的问题  昨天晚上做的  现在还没倒  正在保温箱里放着了   那现在还能测吗？  还准确嘛？
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7楼2011-10-14 11:18:28
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linyekexue

金虫 (正式写手)
准确性在室温下应该是可以的，最好换另外一种方法，那个显色很明显
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8楼2011-10-14 16:57:52
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linyekexue

金虫 (正式写手)
我说的意思是他的室温是25度，但是在40度的话显色也是很好的，所以说有时这个东西还真不好说。
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10楼2011-10-15 11:59:54
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