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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】酵母质粒表达
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pidou213

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】酵母质粒表达

1、请问酵母表达里，pPICZA质粒转入进酵母内后，质粒和酵母染色体是整合的呢，还是单独存在的呢？能否用酵母试剂盒提取呢？
2、如果想多一点表达质粒，是不是用甲醇诱导？我知道甲醇可以诱导表达蛋白量，但是能诱导表达质粒的量么？

谢谢高手
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见得多爱的多
1楼 2010-03-17 23:12:31
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
pidou213(金币+1):谢谢回复啊 2010-03-18 21:21
1，整合
2，0.5%，每24小时补加一次。
pPICZA操作手册，可下载，看完不求人。
http://www.helixnet.cn/bbs/thread-18234-1-1.html
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Thank-you，so-blue.
2楼2010-03-18 09:07:46
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lcat

木虫 (小有名气)
pidou213(金币+1):谢谢 2010-03-18 21:21
嗯 楼上说的对 好好看看毕赤酵母表达手册就全明白啦 可能以后还会遇到各种各样的问题呢
这个质粒是整合的，也就不存在提取、质粒拷贝数等问题啦。甲醇作用是诱导醇氧化酶启动子，启动目的基因的表达。可以先用0.5%试一下，有表达的话再优化一下浓度，也不是越高越好。
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3楼2010-03-18 16:59:05
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pidou213

木虫 (正式写手)
请问那怎么还存在酵母质粒提取的试剂盒呢？？
引用回帖:
Originally posted by lcat at 2010-03-18 16:59:05:
嗯 楼上说的对 好好看看毕赤酵母表达手册就全明白啦 可能以后还会遇到各种各样的问题呢
这个质粒是整合的，也就不存在提取、质粒拷贝数等问题啦。甲醇作用是诱导醇氧化酶启动子，启动目的基因的表达。可以先用0. ...

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见得多爱的多
4楼2010-03-18 21:21:57
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
pidou213(金币+1):谢谢解答啊 2010-03-20 23:19
引用回帖:
Originally posted by pidou213 at 2010-03-18 21:21:57:
请问那怎么还存在酵母质粒提取的试剂盒呢？？




因为酵母质粒分两种嘛，一种是整合型，重组质粒线性化后整合进酵母基因组；另外一种是附加型的，独立于基因组，有一定的拷贝数（于原核载体一样），当然就存在酵母质粒提取的试剂盒了。
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Thank-you，so-blue.
5楼2010-03-19 08:46:01
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pidou213

木虫 (正式写手)
看来我买的试剂盒要浪费了！～
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-03-19 08:46:01:

因为酵母质粒分两种嘛，一种是整合型，重组质粒线性化后整合进酵母基因组；另外一种是附加型的，独立于基因组，有一定的拷贝数（于原核载体一样），当然就存在酵母质粒提取的试剂盒了。

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见得多爱的多
6楼2010-03-20 23:19:18
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