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汕头大学海洋科学接受调剂
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weiminhb

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助质粒提取率低的问题

我最近提质粒put-mini-tn5,开始提不出来。后来菌种活化后,能提出,但是很少,电泳加5微升还很暗,几乎看不到。
       用试剂盒提的,操作没有问题。和另一种质粒一起提,另一种可以提出来。
       请高手赐教,小女子有礼了!
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

菌液多点,10ml
2楼2010-03-16 19:41:10
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Charlie1331

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
要看你的质粒是不是低拷贝的。低拷贝的提法和高拷贝的有差别哦。
3楼2010-03-16 19:50:12
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weiminhb

铁虫 (小有名气)

有理,我先试试吧,多谢了
4楼2010-03-17 08:33:36
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cascc

铜虫 (小有名气)

肯能是低拷贝数的
5楼2010-03-17 20:43:21
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 2010-03-17 21:10
手提还是试剂盒提的?
下来就是刮菌的多少了~一般尽量多弄点~
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
6楼2010-03-17 21:04:18
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lansha8331

无虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是试剂盒的问题吗,可以换一个厂家的,比如威格拉斯质粒大提,量大,保证质粒完整性,而且去除内毒素。
如果不是试剂盒问题,就应该考虑是该菌种的菌液材料问题了,同意二楼说法
7楼2010-03-18 09:14:34
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fanliangzzu

木虫 (初入文坛)

木虫

可能是菌浓度较低
8楼2010-03-18 21:28:47
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csjiang1123

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
什么质粒呀,我现在提pKANNIBAL质粒也有这个问题,正分析原因呢
9楼2010-03-18 21:40:24
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weiminhb

铁虫 (小有名气)

put/mini-Tn5-km2,现在已经解决了,因为是低拷贝质粒,提的时候要加大菌量,另外也加大了抗生素的量

[ Last edited by weiminhb on 2010-3-24 at 10:04 ]
10楼2010-03-24 10:01:45
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