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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助质粒提取率低的问题
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weiminhb

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助质粒提取率低的问题

我最近提质粒put-mini-tn5，开始提不出来。后来菌种活化后，能提出，但是很少，电泳加5微升还很暗，几乎看不到。
       用试剂盒提的，操作没有问题。和另一种质粒一起提，另一种可以提出来。
       请高手赐教，小女子有礼了！
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1楼 2010-03-16 19:16:25
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
菌液多点，10ml
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2楼2010-03-16 19:41:10
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Charlie1331

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
要看你的质粒是不是低拷贝的。低拷贝的提法和高拷贝的有差别哦。
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3楼2010-03-16 19:50:12
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weiminhb

铁虫 (小有名气)
有理，我先试试吧，多谢了
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4楼2010-03-17 08:33:36
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cascc

铜虫 (小有名气)
肯能是低拷贝数的
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5楼2010-03-17 20:43:21
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 2010-03-17 21:10
手提还是试剂盒提的？
下来就是刮菌的多少了~一般尽量多弄点~
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
6楼2010-03-17 21:04:18
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lansha8331

无虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是试剂盒的问题吗，可以换一个厂家的，比如威格拉斯质粒大提，量大，保证质粒完整性，而且去除内毒素。
如果不是试剂盒问题，就应该考虑是该菌种的菌液材料问题了，同意二楼说法
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7楼2010-03-18 09:14:34
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fanliangzzu

木虫 (初入文坛)

木虫
可能是菌浓度较低
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8楼2010-03-18 21:28:47
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csjiang1123

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
什么质粒呀，我现在提pKANNIBAL质粒也有这个问题，正分析原因呢
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9楼2010-03-18 21:40:24
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weiminhb

铁虫 (小有名气)
put/mini-Tn5-km2,现在已经解决了，因为是低拷贝质粒，提的时候要加大菌量，另外也加大了抗生素的量

[ Last edited by weiminhb on 2010-3-24 at 10:04 ]
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10楼2010-03-24 10:01:45
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