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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于细胞培养的几个问题
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骑着蜗牛追火箭

木虫 (著名写手)

纳米小生

[交流] 【求助/交流】关于细胞培养的几个问题

各位大侠:
       小弟转行养细胞,一些问题不懂,特来请教!
       血清冻存时发现上层变清,下层为黄色,解冻后仍然如此,但摇一下以后又好了,且不再分层.这样的血清还能用吗?-20度只放了两个月.
       我用的胰酶是带酚红的那种,红色,为了使用方便,分装成小瓶了,只是因为准备工作的原因,把它分两批操作的,第一天装的冻存后还是红色,第二天装的却变成无色了,这是什么原因?还有活性么?
       培养基加血清是不是要现配现用?最多能放多久?
       培养基粉剂的开包了如果不配完的话,干粉能放多久?

        在下外行,可能问题没有含金量,请各位不吝赐教!
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1楼 2010-03-16 16:59:20
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jAnmee

银虫 (正式写手)
骑着蜗牛追火箭(金币+5):谢谢.胰酶溶液瓶子上写的-20度两年.只是分装一下,隔了一天,差别就那么大. 2010-03-18 08:13
姨酶 可以粉末的话放入-20 半年也没啥大问题。
溶液的话-4，尽快用吧… 我们一般150ml的姨酶一个月也就差不多over了。。。

酚红是pH指示剂。
新鲜的培养基红色的，培养段时间就变成粉红了（24h），再培养的话（48h）就变成黄色的了。。pH变化说明细胞生长旺盛。。如果你细胞培养没咋长，颜色一般不会很大变化（当然，和你培养箱二氧化碳浓度也有关）。不过我这之前说的颜色变化不同细胞之间也应该有差别吧，我用的是F11细胞系。
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国荣，家驹，MJ，为什么我喜欢的恩都死了。。。。
7楼2010-03-18 02:53:31
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
骑着蜗牛追火箭(金币+5):谢谢.短期保存是多久? 2010-03-16 18:49
血清没问题
胰酶无色的不要用了，PH变了，难免是污染
培养基最好现用现加血清，加好后四度短期保存
干粉不配的话，封好后放四度，时间尽量不要太长，
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2楼2010-03-16 17:27:00
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liyangmiscap

木虫 (著名写手)
骑着蜗牛追火箭(金币+5):谢谢 2010-03-16 20:25
血清买来后最好分装在多个小瓶里，方便使用，反复冻存会对其中的一些活性物质有影响。
胰酶解冻后可以保存在4℃冰箱里，也最好找一小瓶装一些方便消化时在水浴锅中孵育；变无色了估计不能用了
维持培养基一般需要的血清量比较少，可以在容量瓶里定容，更便于方便配制，在4℃保存1~2个月是没太有问题的
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愿与你携手，沿河看柳
3楼2010-03-16 20:17:06
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jAnmee

银虫 (正式写手)
骑着蜗牛追火箭(金币+5):谢谢 2010-03-17 08:14
“血清冻存时发现上层变清,下层为黄色,解冻后仍然如此,但摇一下以后又好了,且不再分层”

不要紧，不放心的话可以0.45啥啥的过滤
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国荣，家驹，MJ，为什么我喜欢的恩都死了。。。。
4楼2010-03-17 02:40:36
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