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pidou213

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】EB染色剂的用量和loading buffer

1、EB染色剂的用量(听说标准时0.5ug/ml)大了会怎样?少的话又会怎么样呢?
2、6 x Loading Buffer 理论上为5ul样品+ 1uLoading buffer,但是如果我加入了l  2ulloading buffer 会有什么样的影响呢?/
谢谢
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见得多爱的多
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)

现在都不用EB了,改用GELRED,效果很好,并且无毒,虽然贵点,但一支可以用很久很久,建议换掉
不知道什么是生活了,也不知道生活是什么了
3楼2010-03-16 12:49:35
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

pidou213(金币+1):谢谢详细的讲解。 2010-03-16 13:08
1. EB多了,会使条带过亮,这样如果多条带,就可能分不开,或者曝光太大,还会出现胶一半亮一半暗的情况,这是由于EB带正电,向负极泳动的原因,少一点现象不会太明显,不会影响拍照,而且EB很危险,尽量少用;EB少了,条带弱,非特异性条带看不清楚,造成PCR产物不纯尚不知道

2. loading加多一点没有问题,有些产物,比如切胶回收的产物,就需要多加一点,不然样品浓度太低,会漂出点样孔。当然不能加太多,会使样品浓度过低
2楼2010-03-16 12:45:36
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