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pidou213

木虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】EB染色剂的用量和loading buffer

1、EB染色剂的用量（听说标准时0.5ug/ml）大了会怎样?少的话又会怎么样呢？
2、6 x Loading Buffer 理论上为5ul样品+ 1uLoading buffer，但是如果我加入了l 2ulloading buffer 会有什么样的影响呢？/
谢谢

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见得多爱的多

1楼 2010-03-16 12:22:44

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yujiaping1

木虫 (著名写手)

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pidou213(金币+1):谢谢详细的讲解。 2010-03-16 13:08

1. EB多了，会使条带过亮，这样如果多条带，就可能分不开，或者曝光太大，还会出现胶一半亮一半暗的情况，这是由于EB带正电，向负极泳动的原因，少一点现象不会太明显，不会影响拍照，而且EB很危险，尽量少用；EB少了，条带弱，非特异性条带看不清楚，造成PCR产物不纯尚不知道

2. loading加多一点没有问题，有些产物，比如切胶回收的产物，就需要多加一点，不然样品浓度太低，会漂出点样孔。当然不能加太多，会使样品浓度过低

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2楼2010-03-16 12:45:36

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阳光金鱼唐

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现在都不用EB了，改用GELRED,效果很好，并且无毒，虽然贵点，但一支可以用很久很久，建议换掉

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不知道什么是生活了，也不知道生活是什么了

3楼2010-03-16 12:49:35

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