应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】菌落PCR VS 提质粒测序
61/1返回列表
查看: 648  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 pidou213 的 2 个金币

pidou213

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】菌落PCR VS 提质粒测序

1、请问是菌落PCR和 提质粒测序哪一种更方便快捷一点？
2、我总感觉PCR需要摸索大量的条件，不是很容易P出来，不知道大家的看法怎么样？


请大家一起来....
回复此楼

» 猜你喜欢
见得多爱的多
1楼 2010-03-16 12:14:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
amisking(金币+3): 2010-03-16 21:04
菌落PCR不同于一般的PCR，引物序列位于载体上，很容易就做出来了，退火温度也不需要筛选，但是菌落PCR由于很多原因，其可靠性不如回收质粒酶切可靠。
由于菌落PCR方便快捷不容忽视，我们一般选择两种方法结合来做，多挑选几个菌斑PCR，同时将这些菌斑进行放大，PCR结果出来后，选取少数几个阳性提质粒，酶切鉴定，通常会发现，菌落PCR阳性的结果，很多片段大小还存在问题，最后将酶切正确的阳性，送样测序
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-03-16 12:52:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

木虫 (正式写手)
那也就是把所有的方法都做一遍啦？？
我做的酵母表达，听说转入酵母的都是整合型，如酵母整合在一起了，没有质粒存在了呢？
所以质粒很难提取啊
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-03-16 12:52:08:
菌落PCR不同于一般的PCR，引物序列位于载体上，很容易就做出来了，退火温度也不需要筛选，但是菌落PCR由于很多原因，其可靠性不如回收质粒酶切可靠。
由于菌落PCR方便快捷不容忽视，我们一般选择两种方法结合来做 ...

赞一下 回复此楼
见得多爱的多
3楼2010-03-16 13:04:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by pidou213 at 2010-03-16 13:04:48:
那也就是把所有的方法都做一遍啦？？
我做的酵母表达，听说转入酵母的都是整合型，如酵母整合在一起了，没有质粒存在了呢？
所以质粒很难提取啊


那你就多送几个阳性吧，测序后分析吧，就是能多花点钱，看你们老板有没有钱了
赞一下 回复此楼
4楼2010-03-16 17:00:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

木虫 (正式写手)
当然是老板没有钱才这样说的嘛！~嘿嘿


那经济实惠的方法是什么呢？

还请不吝赐教啊！~




如果没有测序的话，其他的方法具有强的说服力么？
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-03-16 17:00:31:


那你就多送几个阳性吧，测序后分析吧，就是能多花点钱，看你们老板有没有钱了

赞一下 回复此楼
见得多爱的多
5楼2010-03-16 20:03:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mofatuzi

新虫 (小有名气)
我都是挑好菌后摇起来再加1微升菌液PCR，好P的序列，基本上都能P出来，有阳性的直接送测序。省时间
赞一下 回复此楼
6楼2010-03-17 11:11:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 pidou213 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 求调剂院校信息 +5 CX 330 2026-03-21 5/250 2026-03-22 11:32 by 杨杨杨紫
[考研] 生物学一志愿985，分数349求调剂 +4 zxts12 2026-03-21 7/350 2026-03-22 09:57 by zxts12
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 考研调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 0805 316求调剂 +3 大雪深藏 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:55 by 学员8dgXkO
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +3 Jack?k?y 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:17 by JourneyLucky
[考研] 初始318分求调剂（有工作经验） +3 1911236844 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:33 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 281求调剂（0805） +14 烟汐忆海 2026-03-16 25/1250 2026-03-20 15:47 by yuncha
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 085601专硕，总分342求调剂，地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭