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[交流]
【求助/交流】小片段克隆遇到了难题，请教大家了
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| 最近在做一个小片段克隆，片段大小300bp，载体4kb左右，选择的酶切位点是BamHI和BglII，我先做了双酶切片段和载体，验证后都是空载，考虑到可能在公共缓冲K中BglII有星号活性，就采用一个一个酶切，时间在10h以上，结果连接后板上什么都不长了，又考虑可能是连接酶的问题，但同时做的其他克隆能挑到正确转化子，所以很奇怪，应该这样的小片段克隆是很容易做的，不知道哪里出了问题，请教大家了，谢谢啊！ |
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2楼2010-03-16 08:36:51