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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】小片段克隆遇到了难题,请教大家了

最近在做一个小片段克隆,片段大小300bp,载体4kb左右,选择的酶切位点是BamHI和BglII,我先做了双酶切片段和载体,验证后都是空载,考虑到可能在公共缓冲K中BglII有星号活性,就采用一个一个酶切,时间在10h以上,结果连接后板上什么都不长了,又考虑可能是连接酶的问题,但同时做的其他克隆能挑到正确转化子,所以很奇怪,应该这样的小片段克隆是很容易做的,不知道哪里出了问题,请教大家了,谢谢啊!
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Charlie1331

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-03-16 12:26
10h切的时间是不是有些长啊……会不会切碎掉了。
2楼2010-03-16 08:36:51
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