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[交流]
【求助/交流】小片段克隆遇到了难题,请教大家了
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| 最近在做一个小片段克隆,片段大小300bp,载体4kb左右,选择的酶切位点是BamHI和BglII,我先做了双酶切片段和载体,验证后都是空载,考虑到可能在公共缓冲K中BglII有星号活性,就采用一个一个酶切,时间在10h以上,结果连接后板上什么都不长了,又考虑可能是连接酶的问题,但同时做的其他克隆能挑到正确转化子,所以很奇怪,应该这样的小片段克隆是很容易做的,不知道哪里出了问题,请教大家了,谢谢啊! |
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Charlie1331
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