24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 388  |  回复: 3
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 chchy2085 的 7 个金币

chchy2085

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】PCR问题

急切求助大家
我的问题是这样的:我在一个嵌合抗体细胞株中提取轻链基因,年前已经弄出来了,因为我要和重链做重叠pcr,所以回收的轻链基因用完了,这个学期开学后又重新调了一次轻链的基因也用完了,然后我在弄,在也弄不出来了,我抽RNA,然后RT-PCR,得到cDNA,在PCR,电泳后,可以得到目的条带,但是很暗,可是当我在以PCR产物为模板进行二次PCR的时候却再也p不出来了,不知道是什么原因啊,试剂条件都没有变,我已经弄了很长时间了,望各位兄弟姐妹们给点建议,衷心感谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qqsvery

木虫 (著名写手)

chchy2085(金币+5): 2010-03-18 14:29
“再PCR,电泳后,可以得到目的条带,但是很暗”

从这步起,你割胶回收纯化目的片段,然后进行二次PCR,做电泳检测,试试看吧!
谎言和真实在河边洗澡,谎言先洗好,穿走了真实的衣服,真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言,却很难接受赤裸裸的真实。
2楼2010-03-16 19:29:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

chchy2085(金币+5): 2010-03-18 14:29
优化pcr条件
3楼2010-03-17 09:36:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jzhyang

铜虫 (小有名气)

chchy2085(金币+3): 2010-03-22 13:36
Pcr体系有问题,看看是酶还是buffer哪个环节
4楼2010-03-21 21:08:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 chchy2085 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见