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zzCTGU

铜虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 427.3
散金: 7
红花: 2
帖子: 83
在线: 24.2小时
虫号: 964840
注册: 2010-03-08
性别: MM
专业: 生物物理、生物化学与分子

[交流] 【求助/交流】酵母原生质体制备

各位木虫，新木虫在此请教关于酿酒酵母和管囊酵母原生质体制备的问题，我每次参考文献用2%蜗牛酶对酵母进行细胞壁的破碎1—3h，但破碎率并不高，请问哪位有较好的方法。不甚感谢！

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1楼 2010-03-14 20:11:46

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

guanni1011

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 318.9
帖子: 48
在线: 2.5小时
虫号: 328552
注册: 2007-03-21
性别: MM
专业: 微生物遗传育种学

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3): 2010-03-16 12:30

1、预处理剂中用β巯基乙醇，效果会比DTT好
2、最好用蜗牛酶和纤维素酶的混合液共同作用，浓度要自己摸索，不同酵母酶的浓度不同，还有点注意的是酶解时最好不要放在摇床里摇，这样会将原生质体破碎，我每次都是放在水浴锅中静置，效果也很好，不到60分钟，93%以上酵母酶解好，这样就够了，时间再拖长，原生质体也会碎

[ Last edited by guanni1011 on 2010-3-16 at 12:12 ]