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zzCTGU

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】酵母原生质体制备

各位木虫,新木虫在此请教关于酿酒酵母和管囊酵母原生质体制备的问题,我每次参考文献用2%蜗牛酶对酵母进行细胞壁的破碎1—3h,但破碎率并不高,请问哪位有较好的方法。不甚感谢!
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★ ★
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amisking(金币+1): 2010-03-16 12:30
破碎率不高是个什么概念,破碎率是多少?好像要做一系列处理时间梯度确定好最佳破碎率(70%?)时的时间。
Thank-you,so-blue.
2楼2010-03-14 20:34:48
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zzCTGU

铜虫 (小有名气)

管囊酵母基本不破碎,不知道是否方法有问题!还是谢谢了,我准备用超声波破碎仪试试的。
3楼2010-03-14 20:39:43
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用超声破会把原生质体也一同破碎了吧。
Thank-you,so-blue.
4楼2010-03-15 08:56:25
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chenyyy

无虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 2010-03-16 12:30
你要保证原生质体的活性的话,就得用酶法来处理。

菌龄上可否考虑一下。
5楼2010-03-15 11:12:33
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

★ ★ ★
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amisking(金币+2): 2010-03-16 12:30
一要掌握时间,对数期细胞壁应该是最脆弱的时候,据说崩溃酶效果特别好,也可以混合使用几种酶。
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
6楼2010-03-15 11:30:00
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


amisking(金币+1): 2010-03-16 12:30
为什么不加纤维素酶?
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
7楼2010-03-15 12:15:01
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zzCTGU

铜虫 (小有名气)

非常感谢各位,我会修改下试验方案再做!看看效果如何!
8楼2010-03-15 12:47:44
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1): 2010-03-16 12:30
要加β巯基乙醇,蜗牛酶才有活性,适当的加些纤维素酶效果会更好。
9楼2010-03-15 15:40:06
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小二693

铜虫 (正式写手)

学习了。 收藏下
10楼2010-03-15 22:51:34
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