24小时热门版块排行榜    

查看: 1353  |  回复: 7
当前主题已经存档。

阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】为什么PCR实际扩增的带比目的条带短

我要扩增一个基因的核心序列,之前从来没人做过,基因库里找不到序列号,我参照其他物种自己设计了4对引物,有一对扩出了东西,电泳跑出了一条很亮的带,但比预先的目的条带短100多BP,不过还没有测序,不知道是不是我要的条带。之前扩增另外一个基因也是这样,实际扩出的带都比目标带短,我想知道是为什么,有哪位高人能告诉我,在下将感激不尽!
回复此楼
不知道什么是生活了,也不知道生活是什么了
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-03-15 11:20
我经常找到的短或者长,测序才能知道,等待测序结果吧,有的时候电泳不准,有的时候有插入或者缺失序列,有的时候还会片段不全,比如我跑的3RACE,就在polyA一端缺一段,只能设计引物继续了
2楼2010-03-14 19:23:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Charlie1331

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
100多bp肉眼不容易看出来的啊。也有可能是延伸时间短了点。
3楼2010-03-14 20:06:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangjunzju

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也有这种疑问,期待高人指点
4楼2010-03-14 20:23:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)

电泳用的是DNA Ladder,短100多bp是看的出来的
不知道什么是生活了,也不知道生活是什么了
5楼2010-03-15 09:34:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xj22667

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
个人认为该物种这个基因序列可能就比其他物种的这个短一些呢 建议测序后再决定下一步实验吧
6楼2010-03-15 15:28:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

桂花啊

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
个人认为好像是设计引物时出了问题吧
7楼2010-03-31 22:37:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

siben

铜虫 (小有名气)

电泳条带很宽的话,就看下边缘,大概多少就多少!

另外,扩出比自己短的片段很可能因为引物特异性不强,或者说有片段重叠等等,首先得把引物确认好,看有没问题!这个最重要
最近很困惑!
8楼2010-04-01 21:16:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 阳光金鱼唐 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 298求调剂 +5 上岸6666@ 2026-03-20 5/250 2026-03-22 15:46 by ColorlessPI
[考研] 305分求调剂(食品工程) +4 Sxy112 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:26 by 无懈可击111
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 广西大学材料导师推荐 +3 夏夏夏小正 2026-03-17 5/250 2026-03-21 22:20 by 金昊ML
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 考研调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂,总分315(英一) +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 材料与化工专硕调剂 +7 heming3743 2026-03-16 7/350 2026-03-20 19:31 by zhukairuo
[考研] 0856调剂,是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 0854可跨调剂,一作一项核心论文五项专利,省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
信息提示
请填处理意见