| 查看: 465 | 回复: 7 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 tstsim 的 3 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
tstsim铜虫 (初入文坛)
|
[交流]
【求助/交流】连接的怪事，求助
|
||
|
在做敲除同源重组法。目的片断来自大肠1.2kb,成功连于T载体-pmd19t;选用的抗性基因是氯霉素1kb，成功连于T载体-pmd19t，酶切位点只有唯一的一个---Afl II,位于目的片段的中间大约600bp处。 现分别将两个质粒用afl II酶切，回收，分别得到线性的连着目的片段的载体(切点在目的片段正中)和两端是该酶切位点的氯霉素片断，用t4连接酶kit连接，转化得到转化子十来个。 经菌落pcr验证，能够分别扩出目的片段1.2kb和氯霉素的1kb而不是理论上的1.2kb+1kb=2.2Kb。提出质粒用afl II 酶切却无法切动。 本人新手，重复上述试验3次，同样结果，因此绝非小概率实践，是否是目的片段的二级结构影响了连接？实在想不通，请各位指点！多谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有253人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有0人回复
8楼2010-03-15 22:47:27
mxbeaver
木虫 (著名写手)
浪滔滔~人渺渺~
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.15
- 金币: 2949.4
- 红花: 2
- 帖子: 1064
- 在线: 104.7小时
- 虫号: 290818
- 注册: 2006-10-28
- 性别: MM
- 专业: 蛋白质组学
3楼2010-03-13 10:09:54
tstsim
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 187.5
- 散金: 7
- 帖子: 22
- 在线: 5.1小时
- 虫号: 755946
- 注册: 2009-04-23
- 专业: bioengineering
5楼2010-03-13 22:20:12
Charlie1331
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 712.8
- 散金: 60
- 红花: 1
- 帖子: 401
- 在线: 29.4小时
- 虫号: 668552
- 注册: 2008-12-05
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
6楼2010-03-14 09:34:48
