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guona0329

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】肝微粒体制备相关问题

各位好:
    本人最近刚刚接触肝微粒体制备技术,在制备过程中有些小问题困扰着我,希望有仙人指路,但因囊中羞涩,区区薄礼,不成敬意,还望笑纳!
Q1:在门静脉灌流注射过程中,如何达到在冰上操作的要求?是先将大鼠的肝取下进行吧?
Q2:因为肝微粒体经过超高速离心,已经成块状,如何在不影响活性的前提下将其很好的悬浮?如果分散的不均匀,检测出的蛋白含量是很不准确的吧!
Q3: 看了几篇关于检测肝微粒体酶活的方法的文献,就是想知道如何实现充入CO?有专用的仪器吗?
    问题可能会很白痴,但是的确是初学者发自肺腑的心声,要笑就请偷偷的笑吧,但是笑过之后,请您留下您的答案~~~~~~
       最好哪位热心人,给我留下宝贵的联系方式,以便更方便的赐教,小女子在此谢过!
PS:如果觉得在大庭广众之下公开联系方式不妥,可以以短消息的方式哦*^__^*

[ Last edited by guona0329 on 2010-3-13 at 07:36 ]
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幸福就在你身边~~~
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程程9122

铁虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
472514568(金币+1):谢谢回帖! 2010-03-21 00:25
1,最好是在摘取肝脏之前先进行门静脉灌流,我一般先将灌流液在冰箱里放置一段时间。这样肝脏中的血液能被冲洗出来,摘下之后残血比较难冲干净
2。离心后微粒体成胶冻状,我一般用移液器的枪头或针头吹打,当然得保持低温,
3,我测蛋白含量一般用考马斯法,可能有局限,但比较方便
一起交流 探讨
4楼2010-03-20 22:52:06
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