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汕头大学海洋科学接受调剂
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dhmdddd

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请教M9培养基的配方

各位,知道M9培养基的配方吗?请各位指导一下!!谢谢!
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


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M9培养基
配制1L培养基,应在750m1无菌去离子水(意气消沉至50℃或50℃以下)中加渗透:
5×M9盐溶液 200ml
1 mol/LMgSO4 2 ml
适当碳源的20%溶液(如20%葡萄糖) 20ml
1 mol/LCaCl2 0.1 ml
灭菌的去离子水至980ml。
如果需要,可在M9培养基中补加适当氨基酸和维生素的贮存液。
5×M9盐溶液配制:用无离子水溶解下列盐类,终体积为1L:
Na2HPO4·7H2O 64g
KHPO4 15g
NaCl 2.5g
NH4Cl 5.0g
分装成200ml一份,在15psi(1.05kg/cm2) 高压下蒸汽灭菌15min。
分别配制MgSO4溶液和CaCl2溶液,高压灭菌。用无菌水将5×M9盐溶液稀释至980ml后,加渗透 MgSO4和CaCl2溶液。葡萄糖溶液在加到稀释的M9盐溶液之前,用0.22um滤器过滤除菌。当使用含有染色体上脯氨酸生物合成操纵子缺陷 [△(lac-proAB)]的大肠杆菌以及互补的proAB基因在F'质粒上时,在M9基本培养基中补加下列成分:
0.4%(m/v)葡萄糖 (右旋糖)
5mM MgSO4·7H2O
0.01%硫胺
NZCYM培养基
配制每升培养基,在950ml去离子水中加渗入渗出:
NZ胺 10g
NaCl 5g
酵母提取物 5g
酪蛋白水解物 1g
MgSO4·7H2O 2g
摇动容器直至溶质完全溶解。用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。
在 15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。
NZ胺:酪蛋白酶促水解物(ICN Biochemicals公司)。
NZCYM、 NZYM和NZM也可用BD Biscienses公司的脱水培养基。
NZYM培养基
NZYM培养基除不含酪蛋白水解物外,其他成分与NZCYM培养基相同。
NZM培养基
NZM培养基除不含酵母提取物外,其他成分与NZYM培养基相同。

[ Last edited by yujiaping1 on 2010-3-12 at 16:47 ]
2楼2010-03-12 16:38:35
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