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dhmdddd木虫 (正式写手)
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【求助/交流】请教M9培养基的配方
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各位，知道M9培养基的配方吗？请各位指导一下！！谢谢！ |
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yujiaping1
木虫 (著名写手)
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M9培养基 配制1L培养基，应在750m1无菌去离子水(意气消沉至50℃或50℃以下)中加渗透： 5×M9盐溶液 200ml 1 mol/LMgSO4 2 ml 适当碳源的20%溶液(如20%葡萄糖) 20ml 1 mol/LCaCl2 0.1 ml 灭菌的去离子水至980ml。 如果需要，可在M9培养基中补加适当氨基酸和维生素的贮存液。 5×M9盐溶液配制：用无离子水溶解下列盐类，终体积为1L： Na2HPO4·7H2O 64g KHPO4 15g NaCl 2.5g NH4Cl 5.0g 分装成200ml一份，在15psi(1.05kg/cm2) 高压下蒸汽灭菌15min。 分别配制MgSO4溶液和CaCl2溶液，高压灭菌。用无菌水将5×M9盐溶液稀释至980ml后，加渗透 MgSO4和CaCl2溶液。葡萄糖溶液在加到稀释的M9盐溶液之前，用0.22um滤器过滤除菌。当使用含有染色体上脯氨酸生物合成操纵子缺陷 [△(lac-proAB)]的大肠杆菌以及互补的proAB基因在F'质粒上时，在M9基本培养基中补加下列成分： 0.4%(m/v)葡萄糖 (右旋糖) 5mM MgSO4·7H2O 0.01%硫胺 NZCYM培养基 配制每升培养基，在950ml去离子水中加渗入渗出： NZ胺 10g NaCl 5g 酵母提取物 5g 酪蛋白水解物 1g MgSO4·7H2O 2g 摇动容器直至溶质完全溶解。用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。 在 15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。 NZ胺：酪蛋白酶促水解物(ICN Biochemicals公司)。 NZCYM、 NZYM和NZM也可用BD Biscienses公司的脱水培养基。 NZYM培养基 NZYM培养基除不含酪蛋白水解物外，其他成分与NZCYM培养基相同。 NZM培养基 NZM培养基除不含酵母提取物外，其他成分与NZYM培养基相同。 [ Last edited by yujiaping1 on 2010-3-12 at 16:47 ] |
2楼2010-03-12 16:38:35