24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1719  |  回复: 4
当前主题已经存档。

sarahliu2009

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】质粒摩尔浓度

用T4 ligase连接双酶切质粒和双酶切核苷酸片段时, 应该控制两者的摩尔比例, 质粒的质量浓度可以用电泳和紫外得到, 但是摩尔浓度如何计算? 谢谢大家.
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★ ★
sarahliu2009(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1):我也是 2010-03-12 09:24
sarahliu2009(金币+1): 2010-03-15 13:05
我一般是根据二者电泳的亮度来大致估计下。
Thank-you,so-blue.
2楼2010-03-12 08:44:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
sarahliu2009(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1): 2010-03-12 09:24
PCR回收后可以定量,质粒我习惯一开始酶切的时候就可以获知加了多少了,然后估算一下损失率
3楼2010-03-12 08:46:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

看碱基数就可以了。

★ ★ ★
sarahliu2009(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+2): 2010-03-12 09:24
假设质粒100ng/ul,外源片段10ng/ul,质粒大小3500bp,外源片段1500bp。那么连接体系就可以这样算:质粒的量/片段的量=1/3 =A;质粒的分子量/片段的分子量=3500/1500=B;质粒浓度/外源片段浓度=100/10=C;则连接体系所加的质粒体积/片段体积=AB/C=7/90。然后按照连接要求加入适当的量就可以了。 可以根据说明书的要求按照这个算法算出应加的量,也就是体积。

[ Last edited by wjswj on 2010-3-12 at 08:53 ]
金币是赌出来的
4楼2010-03-12 08:51:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

van0735

铁杆木虫 (小有名气)

★ ★ ★
sarahliu2009(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+2): 2010-03-12 09:24
核酸摩尔数与质量的换算:
1 μg 1,000bp DNA = 1.52 pmol
例如:1 μg pUC18/19 DNA (2,688bp) = 0.57 pmol
如果知道质粒的大小就能算出浓度了
5楼2010-03-12 09:13:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sarahliu2009 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085410 273求调剂 +4 X1999 2026-04-09 4/200 2026-04-11 14:13 by cx1994228
[考研] 22408调剂求助 +7 毂12 2026-04-09 9/450 2026-04-11 09:23 by 哦哦123
[找工作] 山东高校教师考核超级无底线,员工过不下去啦 +3 qut2026 2026-04-09 5/250 2026-04-10 22:52 by qut2026
[考研] 309求调剂 +14 wdhw 2026-04-10 15/750 2026-04-10 21:06 by zhouxiaoyu
[考研] 284求调剂 +9 让我上岸吧阿西 2026-04-09 11/550 2026-04-10 19:18 by 靖jing
[考研] 求调剂 材料与工程 324分 专硕 +19 翩翩一书生 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 11:41 by wp06
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +3 LZH(等待调剂中 2026-04-09 3/150 2026-04-09 21:29 by wutongshun
[考研] 材料专硕调剂 +16 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-07 17/850 2026-04-09 21:16 by wutongshun
[考研] 材料专硕初试分332一志愿西北工业大学, +12 故人?? 2026-04-09 12/600 2026-04-09 18:34 by Ccclqqq
[考研] 求调剂材料科学与工程一志愿985初试365分 +5 材化李可 2026-04-08 5/250 2026-04-09 17:00 by Lilly_Li
[考研] 286求调剂 +19 Faune 2026-04-08 20/1000 2026-04-09 08:36 by 哦哦123
[考博] 材料方向考博,求推荐 +3 言语aaa 2026-04-05 4/200 2026-04-08 22:22 by nxgogo
[考研] 一志愿哈工大,初试329,求环境科学与工程调剂! +11 余未辛 2026-04-06 11/550 2026-04-08 15:21 by screening
[考研] 304求调剂 +16 c297914 2026-04-05 17/850 2026-04-08 13:00 by grayjzr
[考研] 一志愿西南090202求调剂 +4 在线求有学上 2026-04-07 4/200 2026-04-07 19:47 by biomichael
[考研] 081200-11408-367学硕求调剂 +4 1_2_3111 2026-04-06 4/200 2026-04-07 08:13 by jp9609
[考研] 材料调剂 +5 小刘同学吖吖 2026-04-06 5/250 2026-04-06 18:34 by sherry_1901
[考研] 求助 +3 卡卡东88 2026-04-06 4/200 2026-04-06 15:28 by going home
[考研] 0857大类环境工程B区求调剂 +3 龚禹铭 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:22 by 蓝云思雨
[考研] 考研调剂 +11 小sun要好运 2026-04-04 11/550 2026-04-05 08:02 by qlm5820
信息提示
请填处理意见