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【求助/交流】质粒摩尔浓度
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| 用T4 ligase连接双酶切质粒和双酶切核苷酸片段时, 应该控制两者的摩尔比例, 质粒的质量浓度可以用电泳和紫外得到, 但是摩尔浓度如何计算? 谢谢大家. |
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susizheng
木虫 (著名写手)
我們是糖 甜到憂傷
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2楼2010-03-12 08:44:31
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
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3楼2010-03-12 08:46:43
wjswj
木虫 (正式写手)
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看碱基数就可以了。
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sarahliu2009(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+2): 2010-03-12 09:24
sarahliu2009(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+2): 2010-03-12 09:24
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假设质粒100ng/ul，外源片段10ng/ul，质粒大小3500bp，外源片段1500bp。那么连接体系就可以这样算：质粒的量/片段的量=1/3 =A；质粒的分子量/片段的分子量=3500/1500=B；质粒浓度/外源片段浓度=100/10=C；则连接体系所加的质粒体积/片段体积=AB/C=7/90。然后按照连接要求加入适当的量就可以了。 可以根据说明书的要求按照这个算法算出应加的量，也就是体积。 [ Last edited by wjswj on 2010-3-12 at 08:53 ] |
4楼2010-03-12 08:51:44
van0735
铁杆木虫 (小有名气)
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5楼2010-03-12 09:13:15