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bobo8899

金虫 (小有名气)

[交流] 空白与对照相关问题

小弟刚刚准备开始做实验,遇到如何设计空白与对照的问题,想来想去还是没有搞透彻,想请各位大侠指点迷津:

对于大豆蛋白的酶法(单一的酶)水解,并施以一定的温度,要想知道2h后的水解情况(水解度),如何设计空白与对照?
简言之就是空白和对照分别是怎么一回事儿?

为什么有些文章里面只有空白,没有对照?可能问题比较愚钝,见笑了~

先谢谢各位了~
我信!
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dayoupan

新虫 (初入文坛)

bobo8899(金币+18): 2010-03-12 20:51
要想了解这个酶解反应程度,我们不可能询问酶:“请问刚才你们一共降解了多少底物?”我们能通过反应后某波长光吸收、重量等可测数据间接推算,但是光吸收值、重量数值中可能有一部分是目标反应的结果贡献的,还有一部分是其它因素贡献的,比如为使酶保持活性而选用的缓冲溶液也有光吸收,或者缓冲液中的某盐后来也沉淀成为可称量形式,这样光吸收值、重量数值就偏大。也就是说酶解反应的环境因素可能参与最后的测量量,要扣除环境因素的影响就并列安排一个实验,你考察哪个因素就把该因素排外,所得结果代表环境因素造成的影响数值,就成为空白。这里你考察酶的活力就不加酶,你考察底物的被降解程度就不加底物。
对照是参比用,比如大家都认可某酶对某底物在某条件下的降解,为比较你创造的条件是否比它优越,你需要对照;或者你要考察的因素太多,一批实验安排不了,只能一批做完再做一批,为比较不同批次间结果,每批都设一个固定主要条件的作对照,对照相同则结果直接比较,对照不同就只能在批内比较,批批之间还要寻找对照变化原因。
4楼2010-03-11 16:15:10
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nireus

铁杆木虫 (著名写手)

bobo8899(金币+1): 2010-03-12 20:50
空白时间就是不加底物(蛋白),对照时间就是改变添加物(酶),个人理解,不是学生物的
既然一切都会过去,何必那么在乎呢?
2楼2010-03-11 12:22:22
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sammi_deng

金虫 (正式写手)

bobo8899(金币+1): 2010-03-12 20:50
空白试验是指在不加试样的情况下按试样分析规程在同样的操作条件下进行的分析.所得结果的数值为空白值.然后从试样测得结果中扣除此空白值就得到比较可靠的分析结果。
对照实验就是进行两组实验,控制变量,比较不同。
3楼2010-03-11 14:03:29
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wanghuixxx

木虫 (正式写手)

设计总监

懒得罗嗦了,直接给出答案:
空白试验:大豆蛋白水解(不加酶) 并施以一定的温度,2h后的水解情况
对照试验:大豆蛋白水解(加单一的酶),并施以一定的温度,2h后的水解情况
很显然从对比中可以算出水解度

最后说明一下,为什么要空白试验?
因为大豆蛋白本身会有一定程度的水解,你加了酶催化后水解程度就更大(或小)。只有将本身的水解度减去后,才能得出酶催化的水解程度。
OK?
爱生活,爱科技!
5楼2010-03-11 19:57:58
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