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芝之

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有人使用CM-sepharose么?

我想用这个柱子纯化蛋白,在网上查了些资料后,我想这样处理:
用0.5MNaOH清洗柱子,蒸馏水洗至中性,再用2MNaCl再生,然后用10mM,pH4.8的醋酸铵平衡
请高人指点这样处理是否得当?
还有就是我在用NaOH处理的过程中用A280监测柱子的清洗情况,可是,流出的液体清洗了10多倍体积了,还是有0.1左右的吸收值,我以为是柱子上口接的管子与碱反应产生了杂质,我就在上口接的管子流出的液体和柱子流出的液体吸收值差不多的时候就用水洗了,可是用水洗一段时间后,柱子流出的液体A280竟然达到0.2,我很郁闷啊,请问这是怎么回事啊?
万分感激啊!
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