24小时热门版块排行榜    

查看: 866  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

芥末蚕豆

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】手提质粒

碱裂解法提取质粒原理说:染色体DNA和质粒DNA在PH值高达12.6的碱性条件下而变性,当以PH值4.8的NaAC高盐缓冲液调节其PH值至中性时,变性的质粒DNA又复性。我想问一下,所说的调节PH值至中性,是对的吗?我加100ul溶液1、200ul溶液2、150ul溶液3后,溶液的PH值大概是4.8,属酸性范围,我想问一下,是我配错试剂了,还是就是这样,还是还要加碱调节?
我现在提出来的质粒少,会不会是上面这个因素影响的?
回复此楼
开心就好!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
别问了,三种溶液三都配好,分别用,看看各自效果怎样,反正也就是一个上午的事情。

至少应该能够告诉你用了多少多少菌体提取,抽提多少次,最后用多少溶液来溶解,这都不属于商业机密。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
7楼2010-03-09 16:44:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

mever

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
调节值中性是正确的
但你质粒量少应该不是PH值的问题
应该是第二步裂解细菌不充分造成的
2楼2010-03-08 21:50:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
手提质粒 试剂应该是提前配好的吧,直接用的
不过现在都用试剂盒,效率蛮高的~
你可以尝试着把菌刮多一点~
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2010-03-08 21:53:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芥末蚕豆

铜虫 (初入文坛)

菌量肯定不少!隔壁的师姐用了我得一半,提出来的超亮!人家不让参观,我也不知道问题出在哪里了!
大家都是按照工具书的操作的!今天测了一下,加完溶液3之后,上请PH是4.8!不是中性!是不是问题出在这了啊?
开心就好!
4楼2010-03-09 12:30:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见