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lfgc8505

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请问有谁用过origami B感受态细胞么?

请问有谁用过origami B感受态细胞么?
小虫最近买了一支NOVAGEN 的origami B感受态细胞,但是最后发现实验中阳性对照都没长出来,验证试验表明,是感受态细胞的问题。
我的转化程序是:
30微升的感受态+2微升的阳性质粒。冰浴30分钟,42度热激90秒,再冰浴4分钟,然后加200微升的SOC ,37度60转每分,摇60分钟,最后涂平板。
验证试验是换DH5a感受态,结果长出来了,操作完全一样!
因为以前没用过,所以想请教各位虫友,origami B感受态细胞的转化操作是否不一样~!希望各位大侠帮我找找原因!
小虫不胜感激!
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woke2008

新虫 (正式写手)

小建议


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你买的装感受态细胞的管子是不是很厚啊,我们公司做这方面的实验也出现这样的问题,新买的感受态细胞转质粒涂板,第二天什么都没长,你换个普通的管子试试!还有就是热激前,冰上放置的时间,我们做的是15分钟!你试一下看看结果!
忘记了该怎么忘记该怎么办!
2楼2010-03-08 14:28:39
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lfgc8505

金虫 (小有名气)

谢谢你的建议~

引用回帖:
Originally posted by woke2008 at 2010-03-08 14:28:39:
你买的装感受态细胞的管子是不是很厚啊,我们公司做这方面的实验也出现这样的问题,新买的感受态细胞转质粒涂板,第二天什么都没长,你换个普通的管子试试!还有就是热激前,冰上放置的时间,我们做的是15分钟!你 ...

不是我是把感受态细胞取出来放到1.5的EP管中的,好的我试试你的方法。
非常感谢你的建议!
3楼2010-03-09 00:21:06
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lfgc8505

金虫 (小有名气)

请问你的细胞也是origami B 细胞么?

引用回帖:
Originally posted by woke2008 at 2010-03-08 14:28:39:
你买的装感受态细胞的管子是不是很厚啊,我们公司做这方面的实验也出现这样的问题,新买的感受态细胞转质粒涂板,第二天什么都没长,你换个普通的管子试试!还有就是热激前,冰上放置的时间,我们做的是15分钟!你 ...

请问你的细胞也是origami B 细胞么?也是novagen的么?
4楼2010-03-09 00:23:40
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