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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请问有谁用过origami B感受态细胞么？
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lfgc8505

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请问有谁用过origami B感受态细胞么？

请问有谁用过origami B感受态细胞么？
小虫最近买了一支NOVAGEN 的origami B感受态细胞，但是最后发现实验中阳性对照都没长出来，验证试验表明，是感受态细胞的问题。
我的转化程序是：
30微升的感受态+2微升的阳性质粒。冰浴30分钟，42度热激90秒，再冰浴4分钟，然后加200微升的SOC ，37度60转每分，摇60分钟，最后涂平板。
验证试验是换DH5a感受态，结果长出来了，操作完全一样！
因为以前没用过，所以想请教各位虫友，origami B感受态细胞的转化操作是否不一样～！希望各位大侠帮我找找原因！
小虫不胜感激！
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1楼 2010-03-06 23:40:13
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woke2008

新虫 (正式写手)

小建议

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你买的装感受态细胞的管子是不是很厚啊，我们公司做这方面的实验也出现这样的问题，新买的感受态细胞转质粒涂板，第二天什么都没长，你换个普通的管子试试！还有就是热激前，冰上放置的时间，我们做的是15分钟！你试一下看看结果！
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忘记了该怎么忘记该怎么办！
2楼2010-03-08 14:28:39
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lfgc8505

金虫 (小有名气)

谢谢你的建议～

引用回帖:
Originally posted by woke2008 at 2010-03-08 14:28:39:
你买的装感受态细胞的管子是不是很厚啊，我们公司做这方面的实验也出现这样的问题，新买的感受态细胞转质粒涂板，第二天什么都没长，你换个普通的管子试试！还有就是热激前，冰上放置的时间，我们做的是15分钟！你 ...

不是我是把感受态细胞取出来放到1.5的EP管中的，好的我试试你的方法。
非常感谢你的建议！
赞一下 回复此楼
3楼2010-03-09 00:21:06
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lfgc8505

金虫 (小有名气)

请问你的细胞也是origami B 细胞么？

引用回帖:
Originally posted by woke2008 at 2010-03-08 14:28:39:
你买的装感受态细胞的管子是不是很厚啊，我们公司做这方面的实验也出现这样的问题，新买的感受态细胞转质粒涂板，第二天什么都没长，你换个普通的管子试试！还有就是热激前，冰上放置的时间，我们做的是15分钟！你 ...

请问你的细胞也是origami B 细胞么？也是novagen的么？
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4楼2010-03-09 00:23:40
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