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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】引物设计与PCR产物相关性
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gydgs033

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】引物设计与PCR产物相关性

请教pcr高手啊
1）我现在用ABI公司primer express2.0设计引物，探针。
不知为何设计出的上下游引物加上探针的长度，居然和目的产物相差无几。
会有这种情况出现么？如果这样，我想就不必非得用什么高保真酶什么了吧，总共才差几个碱基，感到非常困惑，请假达人指点啊
2)荧光定量pcr产物一般多长啊
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1楼 2010-03-06 19:06:37
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
我们都是买的takara的专门real-time PCR ExTaq酶
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5楼2010-03-15 21:52:31
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
gydgs033(金币+1): 2010-03-15 20:48
也就是说你目的产物也就几十bp，好像太短了点，没做过这么短的，一般100bp往上吧，不用太长
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2楼2010-03-06 21:47:10
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
gydgs033(金币+2): 2010-03-15 20:48
最近又研究了一下，一般也就是50-150bp，所以你的产物比较短，很正常，大可以放心。一般跑real-time PCR用得起探针的，都用高保真酶，没多少钱啊
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3楼2010-03-11 15:51:09
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
gydgs033(金币+1): 2010-03-15 20:48
保真度和特异度没有任何相关性
做qPCR最好就是普通Taq，扩增能力强
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4楼2010-03-11 18:44:29
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