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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】血样中的内源性物质可以检测吗
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sq76974940

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】血样中的内源性物质可以检测吗

空白大鼠血浆用2倍的乙腈沉淀后，氮气吹干，再用乙腈复溶，离心后上HPLC，流动相为乙腈和水，几乎一个峰都检测不到...这种情况正常吗？还是方法有问题？
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1楼 2010-03-06 12:18:49
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陈林霖

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
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472514568(金币+1):谢谢回帖！ 2010-03-06 15:56
你是用什么检测器检测的，如果是紫外就很正常，血浆中的内源性物质几乎都是微量或痕量的，一般没有明显的紫外吸收，有也是末端，通常都是用ELISA测，有的也能用MS
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2楼2010-03-06 15:29:18
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sq76974940

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 陈林霖 at 2010-03-06 15:29:18:
你是用什么检测器检测的，如果是紫外就很正常，血浆中的内源性物质几乎都是微量或痕量的，一般没有明显的紫外吸收，有也是末端，通常都是用ELISA测，有的也能用MS

就是用的紫外...
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3楼2010-03-07 09:02:57
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sylgh4923

铜虫 (正式写手)
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karl2100(金币+1):多谢指教！ 2010-03-10 11:58
你的检测波长比较高吧，是不是在300NM以上啊？
较低波长、尤其是末端吸收的内源性物质不可能没有紫外吸收。你用的是沉淀法，杂质残留多，吸收会更强。
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4楼2010-03-07 23:06:09
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cranelihe

银虫 (小有名气)
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karl2100(金币+1):3Q 2010-03-10 11:58
首先，如上所说，可能是波长的问题，内源性物质一般在低于250时有吸收。再有，要看你要测定血浆中的什么啊，可能你想测得东西用乙腈沉蛋白并不合适，你要看看化合物本身在乙腈中的溶解度如何啊？多多尝试一下啊！
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5楼2010-03-09 17:09:04
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sq76974940

新虫 (初入文坛)
用了DAD全波长扫描过了，都没有峰！难道说内源性物质不溶在乙腈里面吗？用甲醇也没有东西出来...
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6楼2010-03-09 19:41:12
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my19870627

木虫 (小有名气)
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karl2100(金币+1):谢谢应助！ 2010-03-10 11:59
我最近在用二维SCX-毛细管电色谱分离东西 觉得分出来的东西还挺多的
检测不到可能是因为含量太低，HPLC的检测限比较低，检测不到吧
用毛细管电泳或毛细管电色谱试试看啊~ 说不定会看到的
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7楼2010-03-10 10:35:13
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fengherili

金虫 (初入文坛)
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我是用3倍的乙腈沉淀蛋白，氮气吹干后用甲醇复溶，用紫外检测时是可以看到内源性物质的，但是看不到我所要检测的色谱峰
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8楼2010-03-15 13:25:05
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