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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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sq76974940

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】血样中的内源性物质可以检测吗

空白大鼠血浆用2倍的乙腈沉淀后,氮气吹干,再用乙腈复溶,离心后上HPLC,流动相为乙腈和水,几乎一个峰都检测不到...这种情况正常吗?还是方法有问题?
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陈林霖

至尊木虫 (正式写手)

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472514568(金币+1):谢谢回帖! 2010-03-06 15:56
你是用什么检测器检测的,如果是紫外就很正常,血浆中的内源性物质几乎都是微量或痕量的,一般没有明显的紫外吸收,有也是末端,通常都是用ELISA测,有的也能用MS
2楼2010-03-06 15:29:18
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sq76974940

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 陈林霖 at 2010-03-06 15:29:18:
你是用什么检测器检测的,如果是紫外就很正常,血浆中的内源性物质几乎都是微量或痕量的,一般没有明显的紫外吸收,有也是末端,通常都是用ELISA测,有的也能用MS

就是用的紫外...
3楼2010-03-07 09:02:57
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sylgh4923

铜虫 (正式写手)

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karl2100(金币+1):多谢指教! 2010-03-10 11:58
你的检测波长比较高吧,是不是在300NM以上啊?
较低波长、尤其是末端吸收的内源性物质不可能没有紫外吸收。你用的是沉淀法,杂质残留多,吸收会更强。
4楼2010-03-07 23:06:09
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cranelihe

银虫 (小有名气)

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karl2100(金币+1):3Q 2010-03-10 11:58
首先,如上所说,可能是波长的问题,内源性物质一般在低于250时有吸收。再有,要看你要测定血浆中的什么啊,可能你想测得东西用乙腈沉蛋白并不合适,你要看看化合物本身在乙腈中的溶解度如何啊?多多尝试一下啊!
5楼2010-03-09 17:09:04
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sq76974940

新虫 (初入文坛)

用了DAD全波长扫描过了,都没有峰!难道说内源性物质不溶在乙腈里面吗?用甲醇也没有东西出来...
6楼2010-03-09 19:41:12
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my19870627

木虫 (小有名气)

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karl2100(金币+1):谢谢应助! 2010-03-10 11:59
我最近在用二维SCX-毛细管电色谱分离东西 觉得分出来的东西还挺多的
检测不到可能是因为含量太低,HPLC的检测限比较低,检测不到吧
用毛细管电泳或毛细管电色谱试试看啊~ 说不定会看到的
7楼2010-03-10 10:35:13
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fengherili

金虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我是用3倍的乙腈沉淀蛋白,氮气吹干后用甲醇复溶,用紫外检测时是可以看到内源性物质的,但是看不到我所要检测的色谱峰
8楼2010-03-15 13:25:05
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